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艾滋病病毒（HIV）检测方法有哪些（非常全）？

泰然健康网
2025-06-25 06:47

感染科吴燕辉医生

2025-01-26 21:31 龙岩 | 吴燕辉，毕业于福建医科大学感染科主治医师，学士学位，擅长各种肝炎、肺结核、艾滋病、发热等感染性疾病诊治，尤其对重型肝炎、肝衰竭、肝硬化并发症等疾病有较丰富的临床经验，掌握血浆置换术、双重血浆分子滤过吸附术、双重腹水超滤浓缩回输术等人工肝支持系统技术。

这种检测方法简单、应用广泛。它可以不受场地、规模的限制，甚至有些朋友在家里就可以操作,就是我们常说的快速诊断法。这种技术的特点，就是非常直观，任何人经过短期的培训，都可以判断出正确的结果。这种快速的诊断方法在一般情况下， 20分钟就可以做出诊断。我们通过检测血清里的抗体就可以检测出是否感染了艾滋病。

用ELISA检测P24抗原，在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在。由于P24量太少，阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。

用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。

艾滋病检测试纸条是使用胶体金免疫层析科技研发的新-代检测试剂。它可检测血清或血浆标本中的HIV-1/2特有性抗体。所有操作时间15分钟，动作简便、迅速、准确、自带质控对照无需所有附加药剂。适合个人检测，也适合各大医院，疾控中心检测。

用这种方法检测，敏感性、特异性都非常好。检测口腔粘膜渗出液。这也是一种非常快速、简便的方法。病人是无创的。这种无创有如下好处: 一方面被检测的人没有痛苦，另外对操作的人来讲，也避免了一些职业暴露，一些操作中的污染。检测艾滋病抗体,相当于完成了一半，这是一个初筛实;验，特异性稍微差一点，因为它还需要一个确诊实验来确定抗体是否真的存在?艾滋病病毒的抗体，是否存在假阳性或交叉免疫的现象。

艾滋病还有一个窗口期，即从感染HIV到机体产生抗体的这一段时间称之为窗口期，在窗口期检测不到抗体，但是体内已含有HIV,因此，窗口期同样具有感染性。窗口期现在也有办法来检测，就是可以查抗原(病毒的组成部分)，比如查PR10抗原，也可以查病毒的RNA(病毒载量)这种方法都是非常敏感的，可以通过这些方法,诊断一些窗口期感染的病人。

该方法是初筛实验室最常用的、也是最主要的检测HIV抗体的方法，ELISA法的试剂盒发展比较迅速目前已发展到第4代。第1代试剂检测HIV抗体试剂，主要用于献血员的筛查，该试剂的最大缺点是假阳性率高，这是由于试剂中含有宿主细胞成分。第2代试剂以基因工程重组技术为抗原，包括了P24、gp36、gp41、g120等，能同时检测HIV-1、HIV-2型，特异性较第1代试剂有了很大的提高，检测窗口期也比第1代试剂缩短了3周左右。第3代试剂该试剂采用双抗原夹心法检测抗体，能同时检测IgM抗体，试剂盒的灵敏度较第2代试剂有所提高，假阳性控制在0.26%左右，检测窗口也比第2代检测方法缩短了1周左右，该试剂是目前初筛实验室最常用的试剂盒。第4代试剂在第3代试剂盒的基础上增加了P24抗原的检测，主要的优缺点如下：1）优点：此方法提高了试剂的敏感度，缩短了感染窗口期，较3代试剂缩短了4天左右的窗口期，减少了窗口期漏检的概率。2）缺点：由于抗原核抗体同时包被在反应板上，存在相互干扰的可能，影响了免疫反应的特异性。单从检测抗体的角度出发第4代试剂检测P24抗原敏感度最低为20pg/ml，而第3代单独检测抗体分析法敏感度最低可达3.5pg/ml。因此在初筛实验室第4代试剂想完全取代第3代试剂尚需进一步提高试剂盒的检出敏感度。

该方法是通过包被HIV 抗原的颗粒凝集来检测 HIV 抗体是否存在的一种方法，血清中的抗体与试剂中颗粒载体上的 HIV抗原结合带动载体颗粒的凝集，出现肉眼可见的凝集现象。该方法适合简便快速筛选，由于敏感度和特异性较低，在献血及大型医院不作为常规检测方法。

将硝酸纤维膜作为固相载体，将 HIV 抗原包被在膜上，当被检测血清中含有HIV 抗体时即可与抗原结合，然后结合物与酶标记抗人免疫球蛋白结合，在底物的参与下可在膜上形成肉眼可见的着色斑点。由于该试剂需要洗涤、加底物等，所以完成一个检测需要时间较长，试剂价格高，使用者较少。

该技术与免疫斑点技术相似均采用了硝酸纤维膜，该方法是在纤维膜条的上方和下方均置入胶体金标记的基因重组 HIV -1/2 抗原，检测被检血清中无 HIV - 1/2 抗体。该方法与酶联免疫吸附试验相比敏感度远不及，但该方法试剂盒常温保存，实验操作简单，肉眼可观测无需特殊检测仪器，在基层实验室的应用广泛。

该方法是将感染HIV的细胞作为HIV抗原固定在玻片上，将被检测者的血清加入玻片，如被检测者血清中含有HIV抗体，则可以固定的抗原形成抗原抗体复合物。进一步加入荧光标记的抗人IgG，使抗原抗体复合物着色，通过荧光显微镜可观测到着色的细胞，此时即可断定被检者血中是否存在HIV抗体。

此方法操作简单，敏感度和特异性较ELISA要高，但也存在不足，很多在着色过程中存在非特异性的荧光着色难以去除，在判断结果时需要有经验的检验师才能区分，同时该检测需要高倍荧光显微镜。

本方法敏感度和特异性均较高，但因试剂制备复杂、成本高，且放射性核素对人体及环境有严重的危害，对操作者要有严格的防护，对检测后的残物垃圾要深埋处理。

该方法是我国卫生部颁布的《艾滋病检测技术规范》中唯一的HIV感染确诊实验方法，该方法常用来甄别其他HIV检测试剂盒的“优劣性”的金标准，免疫印迹法的特异性和敏感度较ELISA要高很多，其假阳性率<1/10000，假阴性更低，约为1/25万。

该方法是目前最特异、最敏感的证实HIV感染的方法，也是目前国内HIV确诊试验的首选方法。该方法检测时实验操作一定要按严格要求，文献报道不当的操作可使假阳性率超过2%。

检测HIV-1p24抗原检测是HIV-1诊断过程中的辅助诊断，目前采用ELISA双抗体夹心法测定被检患者血液中P24蛋白，此方法敏感度差，只作为HIV的辅助诊断，不能依次确诊，主要是用于初筛时HIV阳性，确认试验阴性时的一种辅助诊断。

主要包括反转录PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(Re-al-timePCR)等。既往HIV-1病毒载量检测主要用于监测抗病毒治疗的效果，或辅助HIV感染诊断。2015年的《全国艾滋病检测技术规范》明确提出使用病毒载量检测作为补充试验的策略，对于筛查试验有反应者建议核酸检测或2-4周后复查。在2018年的《中国艾滋病诊疗指南》和2019年的《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》行业标准中明确提出对于成人、青少年及18月龄以上儿童，HIV抗体筛查试验有反应和血浆病毒载量大于5000拷贝/mL时，即可诊断HIV感染。

核酸检测作为补充试验策略，可极大提高HIV-1抗体不确定样本的诊断率及诊断效率，缩短诊断周期，使感染者及早获得治疗。

CD4细胞检测是判断HIV感染者免疫状况、临床分期，评价抗病毒药物治疗效果的重要指标。主要包括：一是流式细胞仪测定法，包括双平台法（DPT）和单平台法（SPT），另一类是非流式细胞仪测定法，如基于成像技术的细胞计数仪。

HIV耐药是指病毒因发生变异而对某种药物敏感性降低。耐药变异株的出现源于HIV的快速复制更新和HIV反转录酶的高错配率，导致高突变率和新病毒株不断产生。在抗病毒药物存在的情况下，耐药毒株被药物选择成为优势株。

HIV耐药检测方法可分为基因型检测和表型检测，主要是对耐药相关基因突变的检测，检测病毒基因的pol区是否存在与抗反转录病毒药物（如蛋白酶抑制剂、反转录酶抑制）易感性降低相关的突变，并利用耐药基因型解释系统判断是否耐药以及耐药程度，其对于抗病毒治疗具有重要指导意义。