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纤维素酶R

纤维素酶R-10(Cellulase R-10,CAS NO. 9012-54-8),也称为Cellulase "Onozuka" R-10,来源于绿色木霉(Trichoderma viride)。纤维素酶R-10是一种酶混合物,包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和蛋白酶。通常与离析酶R-10(Macerozyme R-10)(货号:MX7351)联合使用降解植物细胞壁以制备原生质体。
本品以冻干粉形式提供,含>10,000 U/g纤维素酶活性。一个活力单位的纤维素酶能够降解羧甲基纤维素释放1 µmole葡萄糖。纤维素酶活性可能被糖类化合物如葡萄糖或纤维二糖所抑制。
酶溶液的制备
【注意】:以下酶溶液的制备体系包括酶的使用浓度仅作为参考,用户可根据具体实验条件或参考文献来做调整。
1–1.5% 纤维素酶R-10(0.1-0.15 g/10ml)
0.2–0.4% 离析酶R-10(0.02-0.04 g/10ml)
0.4M 甘lu醇(0.8M 甘lu醇储存液)
20mM KCl(2M KCl储存液)
20mM MES, pH 5.7(0.2M MES, pH 5.7储存液)
于55℃加热上述酶溶液10min(目的是为了失活蛋白酶并提高酶溶解性),冷却至室温后再加入:
10mM CaCl2(1M CaCl2储存液)
5mM β-Mercaptoethanol (β-ME)(可选)
0.1% BSA(10% BSA储存液,无菌)(可选)
配制好的酶溶液是透明的,可用低吸附的0.45μm滤膜过滤后,酶溶液(pH 5-7)于2-8℃稳定保存24h。建议根据实际需要来配置酶溶液,并尽快用完。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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