茶渣提取蛋白及饲料化利用的初步研究
茶渣提取蛋白及饲料化利用的初步研究
【摘要】： 本文的研究内容主要分为两个部分：一：以茶渣为原料,采用稀碱提取法提取茶渣蛋白质,通过试验,确定了提取蛋白质的最佳条件,并对茶渣蛋白质的沉淀和脱色两个纯化环节做了初步研究,确定了最佳沉淀和脱色条件；二：以茶渣为原料,利用微生物发酵技术进行固体发酵,生产微生物蛋白质饲料的研究,通过试验,确定了最佳发酵条件。主要研究内容与结果如下：(1)采用稀碱提取方法提取茶渣蛋白质,通过单因素实验和正交优化试验,确定了茶渣蛋白质的最佳提取条件为：pH 12、提取温度70℃、液固比50：1、提取时间60min,经提取2次后,茶渣蛋白质提取液中的蛋白质平均提取率为29.71%。并对茶渣蛋白质提取液进行沉淀和脱色的初步纯化研究。选择等电点沉淀法、硫酸铵盐析法和IE-硫酸铵盐析混合沉淀法沉淀茶渣蛋白质,通过试验,三种不同沉淀法对茶渣蛋白质的析出率分别为：等电点法的析出率为37.05%、硫酸铵盐析法的析出率为82.88%、等电点-硫酸铵盐析复合沉淀法的析出率为89.70%,确定等电点-硫酸铵盐析复合沉淀法为茶渣蛋白质的最佳沉淀方法,沉淀条件为：pH值为5、80%硫酸铵浓度的条件下沉淀。并选择颗粒活性炭、粉末活性碳、硅藻土、丙酮为脱色剂,对沉淀后的茶渣粗蛋白进行脱色研究,通过单因素实验和正交试验,确定了茶渣蛋白质最佳脱色条件为：粉末活性炭用量为1.5%、脱色温度50℃、脱色时间60min,最终得到黄灰色蛋白质产品,其中蛋白质含量为88.53%。(2)采用微生物固体发酵技术对茶渣进行发酵生产蛋白质饲料的研究。选择尿素、硫酸铵、硝酸钾三种无机氮为茶渣培养基的无机氮源,通过实验对比,选择尿素作为茶渣培养基中的无机氮源,且添加量在2%时,发酵效果最佳。通过对黑曲霉单菌种发酵、酵母菌单菌种发酵、混合菌种发酵三种不同发酵方法的对比,发酵条件均为：10%的接种量接种到20g培养基中,加入40%水分,温度29℃、尿素添加量2%条件下发酵5d,结果表明,混合菌种发酵效果优于任何单一菌种的发酵效果,所以选择混合菌种发酵为最佳发酵方式,并确定混合菌种的配比比例为1：3(黑曲霉：酵母菌,v/v),在此条件下,发酵效果最佳。对影响混合菌种发酵效果的的四个主要因素：接种量、发酵温度、水分含量、发酵时间进行单因素试验和正交优化试验,最后确定混合菌种最佳发酵条件为：混合菌种配比比例为1：3(黑曲霉酵母菌,v/v)、接种量12%,尿素添加量2%、温度28℃、水分40%、发酵7天时间,发酵产物中蛋白质含量最高能达到29.84%,比空白对照中18.56%的蛋白质含量高出11.28%,发酵产物中蛋白质含量比未经过发酵的茶渣蛋白质含量提高了60.78%,微生物发酵生产蛋白质饲料效果显著。
【学位授予单位】：南京农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
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