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茶树离体增殖与再生体系的建立

本文以无性系品种茶树龙井-43腋芽为外植体,采用附加不同种类激素的MS培养基对其进行组织培养,系统地研究了腋芽离体培养的技术体系,初步探讨了影响腋芽培养的各种因素,初步建立了茶树离体增殖和再生体系。论文取得如下结果:(1)初代培养腋芽初代培养采用1/2 MS为基本培养基,附加BA8.88μmo1-L~(-1)+IBA 0.49μmo1-L~(-1) IBA + GA_3 8.66μmo1-L~(-1)+蔗糖30 g-L~(-1)+琼脂7.0 g-L~(-1)。春季材料的外植体污染率、褐变率比秋季的低,腋芽萌发率比秋季的高;外植体留部分叶柄、接种前用2.0 g-L~(-1) PVP溶液浸泡30 min、接种后在8℃下避光培养16h可以有效降低外植体褐化率。春季材料、合适的外植体类型、培养温度及抗氧化剂的技术组合,有助于提高茶树腋芽初代培养的成功率。(2)继代培养龙井-43的最佳增殖条件是以1/2MS为基本培养基,添加0.05μmo1-L~(-1)或0.1μmo1-L~(-1)的TDZ,配合使用0.25或0.49μmo1-L~(-1)IBA,增殖倍数可以达到2.0以上。茶苗增殖倍数随着TDZ浓度的升高而降低,在含有TDZ的培养基中连续继代也不利于茶苗的增殖与伸长,茶苗在不添加任何植物生长调节剂培养基中能够良好地伸育。(3)愈伤组织的诱导与再生从茶树组培苗上取叶片与茎段接种于的1/2MS培养基上,植物生长调节剂为TDZ 0.1、0.5、1.0μmo1-L~(-1)与0、0.49、0.98、1.97μmo1-L~(-1) IBA的全组合。当TDZ 0.1μmo1-L~(-1)+ 0.49μmo1-L~(-1)时,对离体茎段和叶片愈伤组织的诱导效果最好,愈伤组织诱导率可达100%;单独使用0.1... (共46页)

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