茶树离体再生初步研究
茶树是以幼嫩芽叶为收获目标的多年生木本经济作物,其富含多种物质,有益人体健康,深受世界消费者的喜爱。选育高产优质的茶树品种尤为重要,植物离体再生技术是选育育种的重要手段。因此,通过植物离体培养技术构建茶树的再生体系,对后续茶树的遗传转化体系及其他研究工作具有重要意义。本文以多个茶树品种为初始材料,研究了通过茶树种子建立的无菌消毒体系,利用无菌体系中的无菌苗的组织器官进行培养诱导,从而构建茶树的离体再生体系,主要结果如下:1、茶树种子消毒体系的建立,找到了最适合茶树种子的消毒方法。根据茶籽的具体情况:(1)茶籽较新鲜时,最佳消毒方法为在超净台外去果皮,多菌灵浸泡12h→超净台内去种壳,75%酒精20 s→无菌水洗3次→100%84消毒液10 min→无菌水洗4次;(2)茶籽放置时间较久,致使茶籽失水严重时,超净台外去种壳,75%酒精3 min→20%Na Cl O 10 min→无菌水洗5次较适。2、茶树胚的离体培养。(1)茶树成熟胚的离体培养,诱导出少量愈伤组织。(2)茶树未成熟胚的离体培养,诱导出愈伤组织,且愈伤组织已出芽。3、茶树茎段离体快繁的建立。(1)利用茶树种子长出来的茎段(去掉腋芽),在MS+30 g/L Sucrose+3 g/L phytal+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA培养基中诱导,最终诱导出大量愈伤组织,但仅有少数长出芽。(2)含有腋芽的茎段诱导出愈伤组织并且分化成芽,生芽数达4.3,部分芽已生根。4、茶树叶片的离体培养。茶树叶片愈伤组织诱导率达95.56%。利用茶树胚、茎段和叶片进行离体培养,目前已诱导出大量愈伤组织。找到了茎段诱导愈伤组织的品种和培养条件,发现了叶片诱导愈伤组织的适宜培养基。为下一步愈伤组织诱导出芽和生根阶段提供了大量实验材料,为进一步的茶树离体再生体系的构建打下基础。 （共48页)
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