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婴幼儿食品中低聚半乳糖含量的检测方法

泰然健康网
2024-12-09 14:51

婴幼儿食品中低聚半乳糖含量的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及乳制品检测领域，具体而言，涉及婴幼儿食品中低聚半乳糖含量的检测方法。
【背景技术】
[0002] 低聚半乳糖不能被人体上消化道消化吸收，可以直接进入大肠，具有低能量、促进肠道双歧杆菌的增殖、改善矿物质元素的吸收、防止骨质减少、改善脂质代谢、预防和治疗便秘、低致龋齿性、生成营养物质、改善营养状况、提高免疫力、增强抗肿瘤和抗衰老的功能。我国卫生部已经批准低聚半乳糖为新资源食品，并且允许添加在婴幼儿食品、乳制品、饮料、焙烤食品和糖果中，食用量每天不超过15克。
[0003] 由于低聚半乳糖是人体肠道中双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌等有益菌极好的营养源和有效的增殖因子，可以改善人体肠道的消化吸收功能，所以，婴幼儿食品中常常添加低聚半乳糖这一营养成分。
[0004] 生产厂家在生产婴幼儿食品的过程中，将低聚半乳糖原料按照一定的比例添加至原料中制得婴幼儿食品成品。在出厂检验时，为了确保成品中低聚半乳糖的含量符合添加要求，需要对其含量进行检测，符合低聚半乳糖添加标准的方可作为成品进行销售。因此，婴幼儿食品中低聚半乳糖含量的检测结果是否准确至关重要。
[0005] 公布号为CN104655771A的专利公开了一种测定配方奶粉中低聚半乳糖含量的检测方法，用热的磷酸盐缓冲液从待测样品中提取低聚半乳糖和乳糖，用半乳糖苷酶将提取液中的低聚半乳糖水解，离心，取上清液过微孔滤膜，氮气吹干或低温真空干燥后，BSTFA 衍生，用丙酮定容。采用气相-质谱联用法分别测定提取原液中游离的半乳糖和乳糖，和酶解分解液中低聚半乳糖和乳糖释放出的半乳糖总量，用酶解分解液后的半乳糖含量减去提取原液的半乳糖含量和乳糖酶解产生的半乳糖含量，计算出样品中低聚半乳糖的含量。
[0006] 上述检测方法的步骤复杂容易产生较大误差，且β-半乳糖苷酶自带少量乳糖，在酶解时被水解，在检测体系中引入外来乳糖，影响检测准确度。
[0007] 有鉴于此，特提出本发明。

【发明内容】

[0008] 本发明的目的在于提供一种适用于生产厂家在出厂前对婴幼儿食品中添加的低聚半乳糖含量进行检测方法。该检测方法针对现有检测方法中因采用酶解而在检测体系中引入外来乳糖，导致检测结果的准确度无法保证且步骤复易产生较大误差的缺陷，选择与婴幼儿食品中添加的低聚半乳糖的品牌号相同的低聚半乳糖作为标准物添加至样品中配成加标液，与样品液经过相同的处理后得到色谱峰，将两者的色谱峰进行对比，筛选出用于定量的特异峰，以此计算得到婴幼儿食品中低聚半乳糖的含量。由于本发明提供的检测方法是直接通过确定低聚半乳糖的色谱峰而进行定量计算，不通过检测乳糖的含量来推算出低聚半乳糖的含量，从而无需使用酶对检测样品进行酶解，也就不存在因酶水解而在检测体系中引入外来乳糖的问题，保证了检测结构的准确性。而且，本发明提供的检测方法步骤简单，无需复杂的操作，最大程度地减少了检测过程中的不确定因素带来的误差。
[0009] 为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
[0010] -种婴幼儿食品中低聚半乳糖含量的检测方法，包括如下步骤：
[0011] (1)采用与样品中添加的低聚半乳糖的品牌号相同的低聚半乳糖作为标准物，配制成不同浓度的标准工作液；
[0012] (2)称取两份相同质量的样品，一份加入所述标准物，加水溶解后配成加标液，另一份直接加水配成相同体积的样品液，将所述加标液和所述样品液经预处理后连同所述工作液依次加至离子色谱仪中进行梯度洗脱，并分别得到色谱图；
[0013] (3)将所述加标液和所述样品液的色谱图进行对比后筛选出用于定量的特异峰，拟合得到所述工作液的标准曲线，再根据样品液色谱图中特异峰的峰面积找出所述标准曲线上对应的浓度，得到婴幼儿食品中低聚半乳糖含量。
[0014] 本发明提供的检测方法的检测原理如下：
[0015] 选择与婴幼儿食品中添加的低聚半乳糖的品牌号相同的低聚半乳糖作为标准物，配制成不同浓度的工作液。由于所用的标准物与婴幼儿食品中的低聚半乳糖出自同一生产厂家，确保标准物在色谱检测过程中和婴幼儿食品中的低聚半乳糖具有相同的色谱行为和响应特性。
[0016] 其次，在样品液中添加一定量的标准物作为加标液，将加标液和样品液经过相同的处理后进样至离子色谱仪中进行检测。由于加标液中的样品质量和样品液中的样品质量相同，且加标液和样品液均经过相同的处理，从而使得两者的色谱图在相同保留时间处具有峰形相同的色谱峰，这一色谱峰既包含低聚半乳糖的色谱峰也包含食品中其它组分的色谱峰，但由于加标液中低聚半乳糖的含量大于样品液，而其他组分的含量均相同，因此，加标液中低聚半乳糖生成的色谱峰虽然和样品液中的低聚半乳糖生成的色谱峰具有相同的保留时间和峰形，但前者的峰高一定大于后者，即前者的峰面积一定大于后者。因此，可通过对比筛选出食品中低聚半乳糖生成的特异峰，将其用作定量计算。根据不同浓度工作液的特异峰的峰面积得到标准曲线，后根据所述样品液中特异峰的峰面积，找出所述标准曲线上对应的浓度，得到所述样品液中低聚半乳糖的浓度，计算得到婴幼儿食品中低聚半乳糖含量。
[0017] 由上述内容可以看出，本发明提供的检测方法是直接通过确定低聚半乳糖的色谱峰而进行定量计算的，由于不通过检测乳糖的含量来推算出低聚半乳糖的含量，从而无需使用酶对检测样品进行酶解，也就不存在因酶水解而在检测体系中引入外来乳糖的问题，保证了检测结构的准确性。
[0018] 本发明提供的检测方法步骤简单，无需复杂的操作，最大程度地减少了检测过程中的不确定因素带来的误差。
[0019] 而且，本发明的检测方法中利用的离子色谱仪直接得到峰面积、拟合出标准曲线，得到样品液中低聚半乳糖的浓度，不但方便快捷，而且计算机操作也进一步保证了结果的准确性。
[0020] 利用离子色谱仪进行检测过程中，多种因素均会对色谱图产生影响。为了保证加标液和样品液中的低聚半乳糖产生的色谱峰峰形好，不拖尾，优选地，步骤(2)中，所述梯度洗脱的步骤中，所用的流动相包括超纯水、2 4 Ο - 2 5 0 m m ο 1 / L N a Ο Η溶液、Ο · 9 -1 · 0 m ο 1 / 1^〇13邙0他溶液加100-110111111〇1/1恥0!1溶液组成的混合溶液和90-100_〇1/1〇13〇)0恥溶液。
[0021] 进一步优选地，步骤(2)中，所述梯度洗脱的步骤中，洗脱时间为60~65min，流动相的流速为〇. 40~0.45mL/min，且所述超纯水的体积分数为0-58%，所述NaOH溶液的体积分数为0-100 %，所述混合溶液的体积分数为0-100 %，所述CH3C00Na溶液的体积分数为0-45% 〇
[0022] 其梯度洗脱的具体条件如下表所示，在离子色谱检测过程中，可根据下表设置离子色谱仪流动相的各个参数。
[0023] 表1离子色谱仪流动相的参数设置表
[0024]
[0025]基于同样的考虑，优选地，步骤（2)中，所述离子色谱仪的分析柱为3mmX 150mm Dionex CarboPac PA20,保护柱为3mmX30mm Dionex CarboPac PA20。
[0026] 进一步优选地，所述分析柱的柱温为30_35°C。
[0027] 优选地，