象耳豆根结线虫海藻糖合成酶相关蛋白、其编码基因、dsRNA及应用的制作方法
本发明涉及生物，具体涉及象耳豆根结线虫海藻糖合成酶相关蛋白、其编码基因、dsrna及应用。
背景技术：
1、海藻糖是一类非还原性双糖，主要存在于真菌、细菌、植物、昆虫和线虫中。研究表明，海藻糖在生物体耐受非生物胁迫(如干旱、缺氧和寒冷等)过程中，发挥着重要的作用。在线虫中，海藻糖合成的唯一途径是通过tps/tpp途径进行的。在线虫模式生物秀丽隐杆线虫中，尿苷二磷酸葡萄糖和葡萄糖-6-磷酸首先通过tps产生海藻糖-6-磷酸，随后通过tpp脱磷酸产生海藻糖。在秀丽隐杆线虫中，cetps1，cetps2和cegob通过调控海藻糖的合成，能够影响秀丽隐杆线虫的寿命及对高温和缺氧的耐受力。在水稻干尖线虫中，abtps和abtpp通过调控海藻糖的合成参与着线虫厌氧生活与对渗透压的耐受力。在松材线虫中，bxtps与bxtpp通过调控海藻糖的合成参与着抗逆型虫态dj3的形成。
2、象耳豆根结线虫(meloidogyne enterolobii)是造成我国农业严重损失的重要根结线虫。近些年的调查表明，象耳豆根结线虫的分布区域已经从最先报道的我国海南和广东省，逐步扩散至广西、福建、云南、湖南、陕西和宁夏等省份。其分布区域的扩展有环境因素，如全球变暖气温升高的影响；但同样可能有线虫自身因素，如低温耐受能力提高的影响。然而在这方面，相关的研究还非常缺乏。海藻糖作为一类在昆虫和植物中广泛报道的低温保护剂，其关键合成酶基因tps和tpp尚未在象耳豆根结线虫中完成鉴定和克隆，因此无法确定其最终功能。
技术实现思路
1、本发明旨在通过对象耳豆根结线虫中tps和tpp基因进行鉴定和克隆，明确其在根结线虫低温耐受过程中所发挥的作用，为解析象耳豆根结线虫分布区域向北扩展的原因，从而更好进行根结线虫病害防控提供基础。另外，对tps与tpp功能的研究，也可以为创制新型杀线剂提供潜在靶标。
2、本发明的目的之一，提供象耳豆根结线虫海藻糖合成酶相关蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.1和seq id no.2所示。
3、本发明的目的之二，提供编码所述蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如seq idno.3和seq id no.4所示。
4、本发明的目的之三，提供沉默所述的基因的dsrna，所述dsrna的核苷酸序列如seqid no.5和seq id no.6所示。
5、本发明的目的之四，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在调控象耳豆根结线虫海藻糖合成中的应用。
6、本发明的目的之五，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在降低象耳豆根结线虫低温耐受能力中的应用。
7、本发明的目的之六，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在防治象耳豆根结线虫中的应用。
8、本发明的目的之七，提供一种含有所述dsrna的产品，所述产品包括降低象耳豆根结线虫海藻糖合成、降低象耳豆根结线虫低温耐受能力或防治象耳豆根结线虫的产品。
9、进一步的，所述产品为水溶液剂型，水溶液中的所述dsrna的浓度为1-3μg/μl。
10、本发明的目的之八，提供一种防治象耳豆根结线虫的方法，包括：沉默所述基因，降低象耳豆根结线虫的低温耐受能力，实现防治象耳豆根结线虫的目的。
11、本发明具有如下有益效果：
12、本发明阐述了象耳豆根结线虫体内海藻糖合成关键基因metps与metpp的基因功能，明确了metps和metpp在象耳豆根结线虫低温耐受过程中发挥重要的作用，为象耳豆根结线虫种群分布区域向高纬度地区扩展提供了可能的解释，同时为新型杀线剂的研发提供了潜在的生物学靶标。
技术特征：
1.象耳豆根结线虫海藻糖合成酶相关蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seqid no.1和seq id no.2所示。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq idno.3和seq id no.4所示。
3.权利要求2所述的基因的dsrna。
4.根据权利要求3所述的dsrna，其特征在于，所述dsrna的核苷酸序列如seq id no.5和seq id no.6所示。
5.权利要求1所述蛋白、权利要求2所述基因或权利要求3所述dsrna在调控象耳豆根结线虫海藻糖合成中的应用。
6.权利要求1所述蛋白、权利要求2所述基因或权利要求3所述dsrna在降低象耳豆根结线虫低温耐受能力中的应用。
7.权利要求1所述蛋白、权利要求2所述基因或权利要求3所述dsrna在防治象耳豆根结线虫中的应用。
8.一种含有权利要求3所述dsrna的产品，其特征在于，所述产品包括降低象耳豆根结线虫海藻糖合成、降低象耳豆根结线虫低温耐受能力或防治象耳豆根结线虫的产品。
9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，所述产品为水溶液剂型，水溶液中的所述dsrna的浓度为1-3μg/μl。
10.一种防治象耳豆根结线虫的方法，其特征在于，包括：沉默权利要求2所述基因，降低象耳豆根结线虫的低温耐受能力，实现防治象耳豆根结线虫的目的。
技术总结
本发明涉及生物技术领域，具体涉及象耳豆根结线虫海藻糖合成酶相关蛋白、其编码基因、dsRNA及应用。所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。所述dsRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。将所述dsRNA摄取到象耳豆根结线虫体内，能够降低象耳豆根结线虫海藻糖合成、降低象耳豆根结线虫低温耐受能力，从而实现防治象耳豆根结线虫。本发明为象耳豆根结线虫种群分布区域向高纬度地区扩展提供了可能的解释，同时为新型杀线剂的研发提供了潜在的生物学靶标。
技术研发人员：潘嵩,魏佩瑶,李英梅,卓侃,林柏荣
受保护的技术使用者：陕西省生物农业研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19
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