肝电刺激对四氯化碳肝损伤大鼠胃动力作用及其机制研究
肝电刺激对四氯化碳肝损伤大鼠胃动力作用及其机制研究
【摘要】： 目的:1、了解四氯化碳所致肝损伤胃动力变化,探讨相关的分子信号机制2、观察肝电刺激对四氯化碳肝损伤模型的胃肠动力变化的影响并探究其可能机制。方法:1、48只6-8周龄的雄性的SD大鼠,随机分为正常对照组、溶剂对照组和四氯化碳组3组,每一组根据腹腔注射次数分为2次组、3次组、4次组。腹腔注射结束后做如下检测:⑴酚红定量法测定胃排空;⑵微板法测定血清ALT、AST活力;⑶肝脏切片HE染色观察肝脏病理状态;⑷RT-PCR检测肝脏中HNF-1α、TGFβ-1m RNA及胃窦中TGFβ-1、n NOS m RNA表达;⑸Western blot检测肝脏中HNF-1α、TGFβ-1蛋白及胃窦中TGFβ-1、n NOS蛋白表达。2、56只6-8周龄的雄性SD大鼠,根据腹腔注射药物种类、电极的置入及是否刺激分为正常对照、溶剂对照、电极对照、真性刺激、假性刺激组。上述5组根据刺激时间长短分为急性组和假性组(急性组刺激时长为2周,慢性组为4周)。结束刺激后做下列检测:⑴酚红定量法测定胃排空;⑵微板法测定血清ALT、AST活力;⑶肝脏切片HE染色观察肝脏病理状态;⑷RT-PCR检测肝脏中HNF-1α、TGFβ-1 m RNA及胃窦中TGFβ-1、n NOS m RNA表达;⑸Western blot检测肝脏中HNF-1α、TGFβ-1蛋白及胃窦中TGFβ-1、n NOS蛋白表达。结果:1、⑴四氯化碳4次注射后胃排空减慢。⑵腹腔2次、3次、4次注射后,ALT、AST活力升高,4次注射后超出正常范围。⑶腹腔4次注射后肝细胞可见明显损伤。⑷腹腔4次注射后肝脏HNF-1αm RNA表达降低,肝脏和胃窦中TGFβ-1m RNA表达增加,n NOS m RNA表达降低。⑸腹腔4次注射后肝脏HNF-1α蛋白表达降低,肝脏和胃窦中TGFβ-1蛋白表达增肌,n NOS蛋白表达降低。2、电极对照组同正常对照组相比,肝酶和肝脏切片HE染色未见明显变化。3、和假性刺激组相比,急性刺激后胃排空加快,肝脏中HNF-1αm RNA及蛋白表达相对增加,但无明显统计学差异,肝脏及胃窦TGFβ-1 m RNA及蛋白表达相对降低,胃窦中n NOS m RNA及蛋白表达增加,但是统计学差异不明显4、和假性刺激组相比,慢性刺激后胃排空加快,肝脏中HNF-1αm RNA及蛋白表达增加,肝脏及胃窦TGFβ-1 m RNA及蛋白表达降低,胃窦中n NOS m RNA及蛋白表达增加,且真性刺激和假性刺激组比较,有明显统计学差异。结论:1、四氯化碳肝损伤模型胃排空延迟同HNF-1α表达减少,TGFβ-1表达增加,神经元n NOS表达减少有关。2、肝电刺激是安全的,无肝脏生化异常和组织学损伤。3、肝电刺激可改善四氯化碳所致肝损伤模型的胃排空,可能与上调HNF-1α,下调TGFβ-1,增加神经元n NOS表达有关。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
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