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PNGase F, N

产品简介  

PNGase F (N-糖苷酶 F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)在酵母中重组表达(比活性:100000 U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带His标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

   另外,我司还提供Fast PNGase F, N-糖苷酶 F(快速版)(Cat#20406ES, 可以在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化),PNGase F, N-糖苷酶 F (750000 U/mL)(Cat#20415ES,比活性:750000 U/mL),以及其他类型的糖苷酶,如Endo H糖苷内切酶H(Cat#20414ES),Endo S糖苷内切酶S(Cat#20413ES)。

翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南

产品信息

编号

组分名称

组分成分

20407ES01

20407ES02

20407-A

PNGase F

PNGase F

15000 U

75000 U

20407-B1

Buffer 1(10×)

5% SDS; 400 mM DTT

150 μL

750 μL

20407-B2

Buffer 2(10×)

200 mM Tris, PH 7.5

300 μL

1500 μL

20407-B3

10% NP-40

10% NP-40 in MilliQ-H2O

300 μL

1500 μL

产品性质

中文别名(Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;肽N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

酵母重组表达

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性(Specific activity)

100000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

储存条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

使用方法

1、变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;

加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20 μL;加入1-2 μL的PNGase F,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

2、非变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。

注意事项

1. PNGase F建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买(Cat#20407-B, 包含20407-B1(750 μL)、20407-B2(1500 μL)、20407-B3(1500 μL))

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240614

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