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基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法.pdf

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1、(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202211566776.0 (22)申请日 2022.12.07 (71)申请人 苏州花时南浦生物科技有限公司 地址 215000 江苏省苏州市吴江区东太湖 生态旅游度假区(太湖新城)开平路 450号5幢806室 (72)发明人 张颢棪赵冰王瑛袁伟丽 (74)专利代理机构 嘉兴亮典知识产权代理有限 公司 33521 专利代理师 吕梅 (51)Int.Cl. A61K 8/9789(2017.01) A61K 8/9722(2017.01) A61K 8/92(2006.01) A61K 8/。

2、73(2006.01) A61K 8/65(2006.01) A61K 8/67(2006.01) A61Q 19/00(2006.01) A61Q 19/02(2006.01) A61Q 19/08(2006.01) (54)发明名称 一种基于海洋生物提取物的美容液及其制 备方法 (57)摘要 本发明涉及一种基于海洋生物提取物的美 容液及其制备方法, 属于护肤品生产技术领域, 包括以下质量份原料: 315份植物提取物、 57份 植物精油、 35份微藻胞外多糖、 35份透明质酸、 510份乳化剂、 35份维生素C、 35份维生素E、 5 7份海源性胶原蛋白和7080份去离子水。 利用海 洋来源。

3、的藻类提取物及胞外多糖和肾状软骨海 绵中提取的胶原蛋白, 赋予产品良好的保湿、 美 白和修复功能; 同时搭配脉冲电场辅助提取的方 法, 降低植物提取的时间和温度, 避免大量使用 有机溶剂, 造成产品成分对敏感肌肤造成的刺 激, 具有成分安全、 功效明显的特点。 权利要求书2页 说明书8页 CN 115708795 A 2023.02.24 CN 115708795 A 1.一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 包括以下质量份原料: 315份植物 提取物、 57份植物精油、 35份微藻胞外多糖、 35份透明质酸、 510份乳化剂、 35份维生素 C、 35份维生素E、 57份海源性胶原。

4、蛋白和7080份去离子水。 2.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 植物提取物 包括积雪草提取物、 石榴提取物、 眼叶楠绿球藻提取物和牛油果种子提取物。 3.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 植物精油包 括杏仁油、 母菊花油、 香叶天竺葵花油和白池花籽油。 4.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 所述乳化剂 为鲸蜡硬脂醇、 鲸蜡硬脂基葡糖苷、 花生醇、 花生醇葡糖苷、 椰油醇、 椰油基葡糖苷、 C12C14 烷基醇或C14C22烷基糖苷中的一种或多种。 5.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取。

5、物的美容液, 其特征在于, 所述微藻胞 外多糖由以下步骤制得: 使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养, 通过0.2 m过滤对培养基进行灭菌, 将 眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中, 在24下以110rpm的速率进行搅拌, 使用卤 素灯进行人工照明, 以16小时和8小时的间隔进行明暗交替, 连续注射二氧化碳含量在 0.52的无菌空气, 培养七天后将培养液在20和无菌条件下以10000 xg离心30分钟, 过滤留固体备用; 将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤, 直至电导率低于2 S/cm, 随后将滤液进行冷冻干燥, 即得微藻胞外多糖。 6.根据权利要求5所述的一种基于海。

6、洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 所述人工海 水培养基由氯化钠、 氯化钾、 CaCl22H2O、 MgCl26H2O、 NaHCO3、 MgSO47H2O、 DL 甘油磷酸 钠、 硝酸钠、 FeEDTA、 Na2EDTA、 H3BO3、 FeCl36H2O、 MnSO47H2O、 ZnSO47H2O、 CoSO47H2O、 氰钴 胺素、 硫胺素和生物素溶于去离子水中制得。 7.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 所述海源性 胶原蛋白由以下步骤制得: 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含有 10mM EDTA、 8M。

7、尿素和100mM 2巯基乙醇的TrisHCl缓冲液, 均质3040分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉淀, 使用乙酸溶液调节pH值至4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白。 8.根据权利要求1所述的一种基于海洋生物提取物的美容液, 其特征在于, 所述植物提 取物由以下步骤制得: 将植物原料在25下浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 使用 脉冲电场进行辅助提取, 指数。

8、衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在 1.2Hz下处理悬浮液10分钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使 用20 m滤纸过滤, 将滤液储存于4保存, 即得植物提取物。 9.一种如权利18任意一项所述的于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 其特征在 于, 包括以下步骤: (1)将配方量的维生素E、 乳化剂和部分植物精油投入油相锅中, 在85下以50rpm的速 率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 权利要求书 1/2 页 2 CN 115708795 A 2 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm。

9、的速率搅拌40分 钟, 得到水相组分, 保温备用; (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组分, 以 30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加入海源性胶原蛋白、 植物精油、 微藻胞外多 糖、 植物提取物和去离子水后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20分 钟, 即得一种基于海洋生物提取物的美容液。 权利要求书 2/2 页 3 CN 115708795 A 3 一种基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法 技术领域 0001 本发明属于护肤品生产技术领域, 具体地, 涉及一种基于海洋生物提取物的美容 液及其制备方法。

10、。 背景技术 0002 皮肤是人体最大的器官, 是人体的第一道防护, 起到重要的保护作用。 随着人们年 龄的增长, 皮肤屏障屏障受损, 失去其原有的保湿和防护效果。 护肤的概念已经深入人心, 皮肤护理对于保持其外观和健康至关重要, 但它也可以增强皮肤的屏障功能, 随着社会的 发展各种功能化护肤品逐渐涌入市场, 以满足对皮肤调理和保护的需要。 0003 目前, 大多数出售的化妆品中都含有化学成分, 用于稳定产品体系, 增强肤感等, 但部分化学添加剂长期使用对人体造成伤害, 例如对羟基苯甲酸酯是化妆品中使用最广泛 的防腐剂, 可以模仿雌激素的作用, 增加女性患乳腺癌的风险, 并影响恶性黑色素瘤的发。

11、 展。 鉴于此, 使用天然来源等无毒成分作为护肤品添加是大势所趋。 此外, 常规提取天然活 性物质仍有需要改善的缺陷, 如大量有机溶剂, 提取时间更长, 温度高等问题。 发明内容 0004 本发明的目的在于提供一种基于海洋生物提取物的美容液及其制备方法, 通过利 用海洋来源的藻类提取物及胞外多糖和肾状软骨海绵中提取的胶原蛋白, 赋予产品良好的 保湿、 美白和修复功能; 同时搭配脉冲电场辅助提取的方法, 降低植物提取的时间和温度, 避免大量使用有机溶剂, 造成产品成分对敏感肌肤造成的刺激, 具有成分安全、 功效明显的 特点。 0005 本发明要解决的技术问题: 本发明解决了传统护肤品中使用的防腐。

12、剂或提取溶剂 中对肌肤造成刺激和毒性的问题, 并且降低了提取天然活性物质过程中使用大量有机溶剂 问题和避免了提取时间长、 提取温度高的缺陷。 0006 本发明的目的可以通过以下技术方案实现: 0007 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 315份植物提取物、 5 7份植物精油、 35份微藻胞外多糖、 35份透明质酸、 510份乳化剂、 35份维生素C、 35份维 生素E、 57份海源性胶原蛋白和7080份去离子水。 0008 进一步地, 所述微藻胞外多糖由以下步骤制得: 0009 使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养, 通过0.2 m过滤对培养基进行灭 菌, 将眼叶楠绿。

13、球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中, 在24下以110rpm的速率进行搅拌, 使用卤素灯进行人工照明, 以16小时和8小时的间隔进行明暗交替, 连续注射二氧化碳含量 在0.52的无菌空气, 培养七天后将培养液在20和无菌条件下以10000 xg离心30分 钟, 过滤留固体备用; 将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤, 直至电导率低于2 S/ cm, 随后将滤液进行冷冻干燥, 即得微藻胞外多糖。 0010 进一步地, 所述人工海水培养基由氯化钠、 氯化钾、 CaCl22H2O、 MgCl26H2O、 说明书 1/8 页 4 CN 115708795 A 4 NaHCO3、 MgSO4。

14、7H2O、 DL 甘油磷酸钠、 硝酸钠、 FeEDTA、 Na2EDTA、 H3BO3、 FeCl36H2O、 MnSO4 7H2O、 ZnSO47H2O、 CoSO47H2O、 氰钴胺素、 硫胺素和生物素溶于去离子水中制得。 0011 进一步地, 所述海源性胶原蛋白由以下步骤制得: 0012 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含 有10mMEDTA、 8M尿素和100mM2巯基乙醇的TrisHCl缓冲液, 均质3040分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉。

15、淀, 使用乙酸溶液调节pH值至4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白。 0013 进一步地, 所述植物提取物由以下步骤制得: 0014 将植物原料在25下浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 使用脉冲电场进行辅助提取, 指数衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在 1.2Hz下处理悬浮液10分钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使 用20 m滤纸过滤, 将滤液储存于4保存, 即得植物提取物。 0015 进。

16、一步地, 植物提取物包括积雪草提取物、 石榴提取物、 眼叶楠绿球藻提取物和牛 油果种子提取物。 0016 进一步地, 植物精油包括杏仁油、 母菊花油、 香叶天竺葵花油和白池花籽油。 0017 进一步地, 所述乳化剂为鲸蜡硬脂醇、 鲸蜡硬脂基葡糖苷、 花生醇、 花生醇葡糖苷、 椰油醇、 椰油基葡糖苷、 C12C14烷基醇或C14C22烷基糖苷中的一种或多种。 0018 一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 包括以下步骤: 0019 (1)将配方量的维生素E、 乳化剂和部分植物精油投入油相锅中, 在85下以50rpm 的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0020 (2)将配方量。

17、的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm的速率搅拌 40分钟, 得到水相组分, 保温备用; 0021 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40, 加入海源性胶原蛋白、 植物精油、 微藻胞外 多糖、 植物提取物和去离子水后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20 分钟, 即得一种基于海洋生物提取物的美容液。 0022 本发明的有益效果: 0023 (1)本发明技术方案中, 利用微藻中眼叶楠绿球藻及其胞外多糖和其他植物提取 物的组合使用, 通过胞外多糖的吸水和锁水。

18、能力和提取物中的低聚糖等成分通过氢键作 用, 与皮肤表面角蛋白结合, 达到良好的保湿效果。 此外, 眼叶楠绿球藻和其他植物提取物 还可以帮助促进胶原蛋白的合成, 减少皱纹, 且具有成分安全的特点。 0024 (2)本发明技术方案中, 利用眼叶楠绿球藻提取物、 积雪草提取物和石榴提取物中 黄酮和皂苷类活性物质, 刺激皮肤成纤维细胞的增殖, 抚平皮肤褶皱, 改善皱纹; 搭配, 海源 性胶原蛋白, 提高胶原蛋白与细胞层纤连蛋白的含量, 达到更好的抗皱效果。 0025 (3)本发明技术方案中, 通过植物精油、 植物提取物和维生素C等物质, 表现出良好 的抗氧化效果, 有效缓解皮肤暗沉; 藻类提取物中含。

19、有的虾青素、 玉米黄质等物质具有良好 的抑制络氨酸酶活性效果, 从而抑制黑色素的合成, 达到深层的美白效果。 说明书 2/8 页 5 CN 115708795 A 5 具体实施方式 0026 下面将结合本发明实施例, 对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完整地描述, 显然, 所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例, 而不是全部的实施例。 基于本发明中的 实施例, 本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例, 都 属于本发明保护的范围。 0027 实施例1 0028 微藻胞外多糖由以下步骤制得: 0029 (1)将28 .13g氯化钠、 0 .77g氯化钾、 1 .6g。

20、CaCl22H2O、 4 .8gMgCl26H2O、 0.11gNaHCO3、 3.5gMgSO47H2O、 0.4gDL 甘油磷酸钠、 3.85g硝酸钠、 0.13gFeEDTA、 0.2gNa2EDTA、 0.244gH3BO3、 0.0096gFeCl36H2O、 0.024gMnSO47H2O、 0.0044gZnSO47H2O、 0.001gCoSO47H2O、 8.75105g氰钴胺素、 4103g硫胺素和4104g生物素溶于去1L离子 水中制备海水培养基。 0030 (2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养, 通过0.2 m过滤对培养基进行 灭菌, 将眼叶楠绿球藻置于含有2。

21、50mL培养基的烧瓶中, 在24下以110rpm的速率进行搅 拌, 使用卤素灯进行人工照明, 以16小时和8小时的间隔进行明暗交替, 连续注射二氧化碳 含量在0.5的无菌空气, 培养七天后将培养液在20和无菌条件下以10000 xg离心30分 钟, 过滤留固体备用; 将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤, 直至电导率低于2 S/ cm, 随后将滤液进行冷冻干燥, 即得微藻胞外多糖。 0031 实施例2 0032 微藻胞外多糖由以下步骤制得: 0033 (1)将28 .13g氯化钠、 0 .77g氯化钾、 1 .6gCaCl22H2O、 4 .8gMgCl26H2O、 0.11gNaH。

22、CO3、 3.5gMgSO47H2O、 0.4gDL 甘油磷酸钠、 3.85g硝酸钠、 0.13gFeEDTA、 0.2gNa2EDTA、 0.244gH3BO3、 0.0096gFeCl36H2O、 0.024gMnSO47H2O、 0.0044gZnSO47H2O、 0.001gCoSO47H2O、 8.75105g氰钴胺素、 4103g硫胺素和4104g生物素溶于去1L离子 水中制备海水培养基。 0034 (2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养, 通过0.2 m过滤对培养基进行 灭菌, 将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中, 在24下以110rpm的速率进行搅 拌, 使。

23、用卤素灯进行人工照明, 以16小时和8小时的间隔进行明暗交替, 连续注射二氧化碳 含量在1的无菌空气, 培养七天后将培养液在20和无菌条件下以10000 xg离心30分钟, 过滤留固体备用; 将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤, 直至电导率低于2 S/cm, 随后将滤液进行冷冻干燥, 即得微藻胞外多糖。 0035 实施例3 0036 微藻胞外多糖由以下步骤制得: 0037 (1)将28 .13g氯化钠、 0 .77g氯化钾、 1 .6gCaCl22H2O、 4 .8gMgCl26H2O、 0.11gNaHCO3、 3.5gMgSO47H2O、 0.4gDL 甘油磷酸钠、 3.85g。

24、硝酸钠、 0.13gFeEDTA、 0.2gNa2EDTA、 0.244gH3BO3、 0.0096gFeCl36H2O、 0.024gMnSO47H2O、 0.0044gZnSO47H2O、 0.001gCoSO47H2O、 8.75105g氰钴胺素、 4103g硫胺素和4104g生物素溶于去1L离子 水中制备海水培养基。 0038 (2)使用人工海水培养基对眼叶楠绿球藻进行培养, 通过0.2 m过滤对培养基进行 说明书 3/8 页 6 CN 115708795 A 6 灭菌, 将眼叶楠绿球藻置于含有250mL培养基的烧瓶中, 在24下以110rpm的速率进行搅 拌, 使用卤素灯进行人工照明。

25、, 以16小时和8小时的间隔进行明暗交替, 连续注射二氧化碳 含量在2的无菌空气, 培养七天后将培养液在20和无菌条件下以10000 xg离心30分钟, 过滤留固体备用; 将上清液在超滤系统中使用100KDa膜进行过滤, 直至电导率低于2 S/cm, 随后将滤液进行冷冻干燥, 即得微藻胞外多糖。 0039 实施例4 0040 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 3g植物提取物、 5g植物 精油、 3g实施例1制备的微藻胞外多糖、 3g透明质酸、 5g乳化剂、 3g维生素C、 3g维生素E、 5g海 源性胶原蛋白和70g去离子水。 0041 一种基于海洋生物提取物的美容液的制。

26、备方法, 包括以下步骤: 0042 准备30g积雪草、 16g石榴、 50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料, 在25下 浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 依次使用脉冲电场进行辅助提 取, 指数衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分 钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使用20 m滤纸过滤, 将滤液 储存于4保存, 即得植物提取物, 保存备用。 0043 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含 有10mM EDTA、 8M尿素和1。

27、00mM 2巯基乙醇的TrisHCl缓冲液, 均质40分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉淀, 使用乙酸溶液调节pH值至4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白, 备用。 0044 (1)将配方量的维生素E、 鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中, 在85下 以50rpm的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0045 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以5。

28、0rpm的速率搅拌 40分钟, 得到水相组分, 保温备用; 0046 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加入海源性胶原蛋白、 1g母菊花油、 1g 香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、 实施例1制备的微藻胞外多糖、 植物提取物和去离子水 后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20分钟, 即得一种基于海洋生物 提取物的美容液。 0047 实施例5 0048 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 7g植物提取物、 6g植物 精油、 4g实施例2制备的。

29、微藻胞外多糖、 4g透明质酸、 8g乳化剂、 4g维生素C、 5g维生素E、 6g海 源性胶原蛋白和75g去离子水。 0049 一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 包括以下步骤: 0050 准备30g积雪草、 16g石榴、 50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料, 在25下 浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 依次使用脉冲电场进行辅助提 取, 指数衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分 钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使用20 m滤纸过滤, 将滤液 储存于4保存。

30、, 即得植物提取物, 保存备用。 说明书 4/8 页 7 CN 115708795 A 7 0051 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含 有10mM EDTA、 8M尿素和100mM 2巯基乙醇的TrisHCl缓冲液, 均质40分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉淀, 使用乙酸溶液调节pH值至4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白, 备用。 005。

31、2 (1)将配方量的维生素E、 鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中, 在85下 以50rpm的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0053 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm的速率搅拌 40分钟, 得到水相组分, 保温备用; 0054 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加入海源性胶原蛋白、 1g母菊花油、 1g 香叶天竺葵花油和2g白池花籽油、 实施例2制备的微藻胞外多糖、 植物提取物和去离子水 后, 继续搅拌30分钟后, 在37和。

32、4000rpm下保温均质搅拌20分钟, 即得一种基于海洋生物 提取物的美容液。 0055 实施例6 0056 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 15g植物提取物、 7g植 物精油、 5g实施例3制备的微藻胞外多糖、 5g透明质酸、 10g乳化剂、 5g维生素C、 5g维生素E、 7g海源性胶原蛋白和80g去离子水。 0057 一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 包括以下步骤: 0058 准备30g积雪草、 16g石榴、 50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料, 在25下 浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 依次使用脉冲电场进行辅助。

33、提 取, 指数衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分 钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使用20 m滤纸过滤, 将滤液 储存于4保存, 即得植物提取物, 保存备用。 0059 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含 有10mM EDTA、 8M尿素和100mM 2巯基乙醇的TrisHCl缓冲液, 均质40分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉淀, 使用乙酸溶液调节pH值至。

34、4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白, 备用。 0060 (1)将配方量的维生素E、 鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中, 在85下 以50rpm的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0061 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm的速率搅拌 40分钟, 得到水相组分, 保温备用; 0062 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加。

35、入海源性胶原蛋白、 1g母菊花油、 2g 香叶天竺葵花油和2g白池花籽油、 实施例3制备的微藻胞外多糖、 植物提取物和去离子水 后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20分钟, 即得一种基于海洋生物 提取物的美容液。 0063 对比例1 说明书 5/8 页 8 CN 115708795 A 8 0064 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 3g植物提取物、 5g植物 精油、 3g透明质酸、 5g乳化剂、 3g维生素C、 3g维生素E、 5g海源性胶原蛋白和70g去离子水。 0065 一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 包括以下步骤: 006。

36、6 准备30g积雪草、 16g石榴、 50g眼叶楠绿球藻和15g牛油果种子植物原料, 在25下 浸泡于去离子水中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 依次使用脉冲电场进行辅助提 取, 指数衰减脉冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分 钟; 随后通过恒温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使用20 m滤纸过滤, 将滤液 储存于4保存, 即得植物提取物, 保存备用。 0067 将肾状软骨海绵原料使用去离子水洗涤3遍, 切块后置于搅拌机中, 加入100mM含 有10mM EDTA、 8M尿素和100mM 2巯基乙醇的TrisH。

37、Cl缓冲液, 均质40分钟, 使用NaOH将体 系pH值调制9, 随后在25下以50rpm的速率搅拌24小时, 于2下以5000g离心20分钟, 弃 去沉淀, 使用乙酸溶液调节pH值至4, 于2下以20000g离心20分钟, 弃去上清, 将沉淀重 悬于蒸馏水中, 于2下以20000g离心30分钟, 冻干保存, 即得海源性胶原蛋白, 备用。 0068 (1)将配方量的维生素E、 鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中, 在85下 以50rpm的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0069 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm的速率搅拌 40分钟, 。

38、得到水相组分, 保温备用; 0070 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加入海源性胶原蛋白、 1g母菊花油、 1g 香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、 实施例1制备的微藻胞外多糖、 植物提取物和去离子水 后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20分钟, 即得一种基于海洋生物 提取物的美容液。 0071 对比例2 0072 一种基于海洋生物提取物的美容液, 包括以下质量份原料: 3g植物提取物、 5g植物 精油、 3g透明质酸、 5g乳化剂、 3g维生素C、 3g。

39、维生素E和70g去离子水。 0073 一种基于海洋生物提取物的美容液的制备方法, 包括以下步骤: 0074 准备30g积雪草、 16g石榴和15g牛油果种子植物原料, 在25下浸泡于去离子水 中, 浸泡12小时后, 于50下加热40分钟后, 依次使用脉冲电场进行辅助提取, 指数衰减脉 冲宽度为0.96 s, 幅度为18kV, 使用8kV/cm电场在1.2Hz下处理悬浮液10分钟; 随后通过恒 温水浴锅在95下加热45分钟, 冷却至室温后, 使用20 m滤纸过滤, 将滤液储存于4保存, 即得植物提取物, 保存备用。 0075 (1)将配方量的维生素E、 鲸蜡硬脂基葡糖苷和2g杏仁油投入油相锅中,。

40、 在85下 以50rpm的速率搅拌40分钟, 得到油相组分, 保温备用; 0076 (2)将配方量的维生素C和透明质酸加入水相锅中, 在85下以50rpm的速率搅拌 40分钟, 得到水相组分, 保温备用; 0077 (3)预热乳化锅至60后, 将水相组分加入乳化锅中, 加热至80后, 加入油相组 分, 以30rpm的速率搅拌10分钟后, 降温至40摄氏度, 加入海源性胶原蛋白、 1g母菊花油、 1g 香叶天竺葵花油和1g白池花籽油、 实施例1制备的微藻胞外多糖、 植物提取物和去离子水 后, 继续搅拌30分钟后, 在37和4000rpm下保温均质搅拌20分钟, 即得一种美容液。 说明书 6/8 。

41、页 9 CN 115708795 A 9 0078 现对实施例13与对比例12制备的美容液进行抗氧化效果测试。 将7mM 2, 2叠氮 双(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)水溶液与2.45mM K2S2O8水溶液置于室温下, 并在黑暗条件下 保持1216小时, 使用96的乙醇溶液以1: 10的比例将该溶液稀释, 获得稀释液。 将200 L实 施例13与对比例中12制备的样品与3.8mL 95的乙醇溶液混合, 加入1mL稀释液, 搅拌均 匀后在黑暗环境下保持6分钟。 使用分光光度计在734nm处测量自由基。 每个样品获得五个 读数并取平均值, 测试结果如下表1所示。 0079 表1实施例13与对比例12。

42、制备的美容液抗氧化效果测试 0080 项目抗氧化活性TEAC/mL 实施例1124456.3 实施例2129669.2 实施例3128651.0 对比例1116847.5 对比例285876.2 0081 由上表1可知, 实施例13中制备的美容液具有更好的抗氧化效果, 由对比例2中的 结果可知, 微藻提取物与其他植物提取物在抗氧化方面具有协同作用。 0082 现在对实施例13与对比例12中制备的美容液进行络氨酸酶活性抑制测试。 将20 L样品、 10 L蘑菇酪氨酸酶溶液和80 L磷酸盐缓冲液混合在微孔板中, 并在37下预孵育5 分钟。 然后加入90 L 2mg/mL左旋多巴, 在37的恒定温度。

43、下, 磷酸盐缓冲液用作空白对照, 在酶标仪中立即在475nm处检测吸光度。 每个样品获得五个读数并取平均值, 测试结果如下 表2所示。 0083 表2实施例13与对比例12中制备的美容液络氨酸酶活性抑制测试 0084 0085 0086 从表2的结果来看, 三个实施例中制备的美容液样品对络氨酸酶活性具有很好的 抑制效果, 从对比例12中的结果来看, 可以证实微藻提取物和及其胞外多糖对络氨酸酶活 性的抑制具有促进作用。 0087 在说明书的描述中, 参考术语 “一个实施例” 、“示例” 、“具体示例” 等的描述意指结 合该实施例或示例描述的具体特征、 结构、 材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例 或示例中。 在本说明书中, 对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。 而 且, 描述的具体特征、 结构、 材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适 的方式结合。 说明书 7/8 页 10 CN 115708795 A 10 0088 以上内容仅仅是对本发明所作的举例和说明, 所属本技术领域的技术人员对所描 述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代, 只要不偏离发明或者超 越本权利要求书所定义的范围, 均应属于本发明的保护范围。 说明书 8/8 页 11 CN 115708795 A 11 。

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