血清制备
· 样本采集:使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液样本。· 静置:将试管或离心管在室温下放置1小时或2~8℃过夜,分离出血清。· 离心:2~8℃条件下,以1000×g离心20分钟,小心收集上清液(血清) 。· 检测/保存:使用收集的血清进行检测。分离的血清在室温下保存不超过8小时,在冷藏条件下保存不超过48小时。超过48小时则应在-20 ℃或以下的条件下冷冻保存。尽可能减少冻融循环次数。
血浆制备
· 样本采集:使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本。· 离心:采集后30分钟内,2-8℃条件下,以1000×g离心15分钟,小心收集上清液(血浆)。· 检测/保存:使用收集的血浆进行检测。分离的血浆在室温下保存不超过8小时,在冷藏条件下保存不超过48小时。超过48小时则应在-20 ℃或以下的条件下冷冻保存。尽可能减少冻融循环次数。
⚠️注意事项
1. 样本采集及处理· 在收集、处理血液样本的过程中应避免溶血,因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质,这种情况下,ELISA实验中将会出现非特异性显色反应,导致检测结果不准确。· 血清样本应在采血后待血液充分凝固再进行血清分离。· 对于含添加剂的真空采血管,采血后应立即轻柔颠倒混匀数次(一般为5至10次,不同类型真空采血管混匀次数的要求不同,需遵循制造商的建议)。2. 样本使用· 在分析前,冷冻样本应该缓慢的冷冻的血清/血浆样本应在室温下解冻,恢复至室温。原因:通过加热的方式快速解冻可能会导致分析物的分解。· 检测前应将样品轻柔地颠倒混匀10到20次。原因:防止解冻过程中形成的样品中浓度分布不均。3. 其他注意事项· 如果保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
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