实验动物操作技术指导手册
一、操作前准备
伦理规范
执行机构IACUC批准实验方案（如批准号：XXXX-XX等）
遵循3R原则（替代、减少、优化）
器材准备
胰岛素注射器（29-31G）或1ml结核菌素注射器
75%乙醇棉球、医用胶带、加热垫（静脉注射专用）
异氟烷麻醉系统（推荐用于静脉注射）
C57BL/6等品系优先，体重18-25g健康小鼠
静脉注射前禁食4小时（自由饮水）
动物准备
二、注射技术规范
1. 皮下注射（Subcutaneous, SC）适用场景：疫苗、缓释制剂、单克隆抗体
解剖定位：颈背部肩胛区
操作流程：
保定人员使小鼠呈"帐篷状"拎起颈背部皮肤
与体表呈**30-45°**进针，深度5-8mm
回抽确认无回血后缓慢推注
拔针后轻压注射点10秒
技术参数：
最大注射体积：2ml（成年鼠）
吸收速率：4-6小时达峰
常见错误：
误入皮内导致局部肿胀（×）
针尖穿透对侧皮肤造成药物流失（×）
2. 皮内注射（Intradermal, ID）适用场景：过敏原测试、结核菌素试验
解剖定位：耳廓背面或尾部近端
操作流程：
乙醇消毒后绷紧注射部位皮肤
**15°**浅表进针至针尖斜面完全进入真皮层
缓慢推注形成直径3-5mm皮丘
退针后可见明显圆形隆起
技术参数：
最大注射体积：50μl
吸收速率：24-48小时局部反应
质控标准：
成功标志：注射后皮肤呈橘皮样外观
失败处理：出现皮下渗漏需重新注射
3. 肌肉注射（Intramuscular, IM）适用场景：抗生素、基因治疗载体
解剖定位：
后肢股四头肌（推荐）
臀部肌群（需避免坐骨神经损伤）
操作流程：
侧卧位固定，后肢自然伸展
90°垂直刺入肌肉中段，深度4-6mm
回抽确认无回血后匀速推注
拔针后按摩注射部位10秒
技术参数：
最大注射体积：50μl（单侧）
吸收速率：30-60分钟达峰
风险预警：
误伤坐骨神经表现：注射后肢体拖行
肌内血肿处理：立即冰敷并上报
4. 静脉注射（Intravenous, IV）适用场景：造影剂、化疗药物、单次大剂量给药
解剖定位：尾静脉（侧支静脉优先）
操作流程：
预热尾静脉（40℃加热垫5分钟）
尾根部扎止血带使静脉充盈
**10-15°**斜面朝上进针，见回血后松止血带
以≤100μl/s速度推注
技术参数：
最大注射体积：1ml（需分次注射时间隔15分钟）
吸收速率：即刻入血
关键控制点：
静脉验证：推注时无阻力，皮肤无苍白隆起
外渗处理：立即停止注射，局部注射透明质酸酶
三、术后护理规范
行为学监测
注射后观察30分钟，评估疼痛表现（如梳理行为减少）
肌肉注射部位每日触诊排除脓肿形成
记录要点
注射坐标定位图
异常反应处理记录表
皮下坏死：局部涂抹磺胺嘧啶银
静脉栓塞：低分子肝素（20IU/kg）皮下注射
并发症处理
最后更新:2025-03-17
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