一种荷叶提取物及其制备方法和应用
摘要： 本发明提供了一种荷叶提取物工艺及其质量控制方法和应用，所述荷叶提取物制备方法为：取荷叶，除杂质，切碎，加水煎煮1‑3次，每次0.5‑2小时，每次料液比为1：5‑20，过滤，合并滤液，浓缩至稠膏状，干燥得荷叶提取物。该制备方法仅采用水提取，制备方法简单，安全，所得提取物更健康且成分丰富，可方便地作为原料制作药物、保健品、食品等产品使用。所述质量控制方法，采用总生物碱含量检测、荷叶碱含量检测、UPLC‑Q‑TOF‑MS分析等多种检测手段、方法，能够对荷叶提取物的成分进行全面质量控制。
主分类号：
A61K36/62(2006.01)(含有来自藻类、苔藓、真菌或植物或其派生物，例如传统草药的未确定结构的药物制剂)
权利要求：
1.一种荷叶提取物制备方法，其特征在于包括： 取荷叶，除杂质，切碎，加水煎煮1-3次，每次0.5-2小时，每次料液比为1：5-20，过滤，合并滤液，浓缩至稠膏状，干燥，得荷叶提取物。 2.根据权利要求1所述的荷叶提取物制备方法，其特征在于： 所述加水煎煮的次数为3次，每次1小时，各次的料液比分别为1：15、1：10、1：10。 3.根据权利要求1所述的荷叶提取物制备方法，其特征在于： 所述荷叶提取物的成分包括荷叶碱、降荷叶碱、莲心季铵碱、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、糖类、氨基酸、原花青素。 4.根据权利要求1到3中任一项所述的荷叶提取物制备方法，其特征在于进一步包括对所述荷叶提取物进行如下检测： (1)总生物碱含量检测； (2)荷叶碱含量检测； (3)总黄酮含量检测； (4)UPLC-Q-TOF-MS检测， 其中，所述总生物碱含量检测包括以下步骤： 试剂配制：配制pH5.0溴甲酚绿溶液； 对照品溶液制备：取荷叶碱对照品，加氯仿配制成对照品溶液； 供试品溶液的制备：取荷叶提取物，加溶剂，提取，固液分离，取液体，即为供试品溶液； 标准曲线的绘制：取不同量的荷叶碱对照品溶液4份，分别加入试剂配制成溶液，测定吸光度，绘制标准曲线； 样品含量的测定：取供试品溶液测定吸光度，带入标准曲线计算含量， 总生物碱含量检测包括： 供试品溶液的制备：所述溶剂为75％乙醇，固液分离方法为于50℃下超声提取， 所述荷叶碱含量检测包括以下步骤： 对照品溶液制备：取荷叶碱对照品，加溶剂制成对照品溶液； 供试品溶液制备：取荷叶提取物，加溶剂，提取，固液分离，制备程供试品溶液； 色谱条件：照高效液相色谱法测定，采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈：水：三乙胺：冰醋酸为流动相进行等度洗脱； 测定：取对照品溶液、供试品溶液,分别注入色谱仪，按外标法测定含量， 所述荷叶碱含量检测包括： 对照品溶液制备具体过程，包括：取荷叶碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含15μg的溶液； 供试品溶液制备具体过程，包括：取荷叶提取物干粉0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声30min后冷却至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取滤液5mL置25mL容量瓶中，加水至刻度线，摇匀； 色谱条件，包括：检测波长为270nm，流速为1.0mL/min，流动相为乙腈：水：三乙胺：冰醋酸＝27:70.6:1.6:0.78， 所述UPLC-Q-TOF-MS检测包括以下步骤： 供试品溶液制备，包括：称取一定量荷叶提取物，用50％甲醇水溶解并稀释至合适浓度，过滤,取滤液； 设定液相色谱条件，包括：采用Waters BEH C18色谱柱，柱温30℃，流速0.2ml/min,以0.1％甲酸水为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表进行梯度洗脱：时间(min)流速(mL/min)A(％)B(％)0.000.20098.02.05.000.20098.02.015.000.20060.040.020.000.2000.0100.021.000.2000.0100.022.000.20098.02.025.000.20098.02.0检测，包括：取供试品溶液,注入UPLC-Q-TOF-MS仪，进行测定， 其中设定质谱条件为：ESI离子源，分别在负、正离子模式下采集数据，扫描分子量范围：50-1500Da，碰撞气为氩气，碰撞能为20-40V，毛细管电压为(-)2.5kV和(+)3.0kV，锥孔电压为40V，源温为120℃，雾化气为氮气，脱溶剂气为氮气，脱溶剂气温度为400℃，锥孔气流量为50L/h，脱溶剂气流量为700L/min。 5.根据权利要求4所述的荷叶提取物制备方法，其特征在于进一步包括对所述荷叶提取物进行如下检测中的至少一种： (5)水分含量检测； (6)总糖含量检测； (7)葡萄糖+果糖+蔗糖含量检测； (8)槲皮素+山奈酚+异鼠李素含量检测； (9)灰分含量检测； (10)氨基酸含量检测； (11)原花青素含量检测。 6.根据权利要求1至5中的任一项所述的荷叶提取物。 7.根据权利要求6所述的荷叶提取物在制作产品中的用途，所述产品是食品、保健品和药品中的一种。
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