茶树叶面真菌与内生真菌群落结构的比较
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第 3 3卷第 1 期 2 0 1 0 年 3月 江 西 植 保 J I ANGXI P L ANT P ROTE CTI ON v o 3 3 ， No 1 Ma E ， 2 O 1 0 茶树叶面真菌与内生真菌群落结构的比较 张宇玲，李小容，杨 民和 ( 福建师范大学生命科学学院，福州 3 5 0 1 0 8 ) 摘要 采用常规真菌分离法对健康茶树叶片叶面真菌和内生真菌进行分离，比较了叶面真菌和内生真菌的种群和 数量差异。结果表明：从茶树品种黄旦 ( HD)共分离得到叶面真菌2 6 个形态型，内生真菌l 8 个形态型；从铁 音 ( T G V )共分离获得叶面真菌l 6 个形态型，内生真菌l 5 个形态型：分离所得真菌大多数为半知菌和予囊菌，少数 为担子菌。 采用稀释平板法和叶片组织黏附法两种不同的真菌分离方法，获得叶面真菌优势种的种类基本一致， 但各种 菌的数量差异明显； 对黄旦和铁观音两品种比较， 采用叶片组织黏附法分离所得叶面真菌的数量没有差异， 但采用稀释平板法所获不同真菌的数量差异明显。真菌分离结果表明在茶树叶片表面和内部组织中生长有显著不 同的真菌群落。 关键词；茶树；叶面真菌；内生真菌；分离；群落结构 l中图分 类号= $ 5 7 1 1 ， Q 9 4 8 1 2 2 3 文献标识码： A 文章编号：1 0 0 6 - 4 2 4 9( 2 0 1 0 ) 0 1 - 0 0 1 8 0 6 ， 植 物叶片栖 居有丰富 真菌群落。人们把附着 于叶面并可以定居和增殖的真菌群体称为叶面真菌 ( f u 谴a l e p i p h y t e s ) 【I J ； 而将寄生于正常生长植物体 内的真菌称为内 生真菌 ( f u n g a l e n d o p h y t e s )2 l 。已 有的绝大多数研究都将叶面真菌和内生真菌独立进 行。因此，叶面真菌与内生真菌虽然生存的微环境 相距不到 1咖 但人们对它们的种群结构差异和相 互关系知之甚少 。近年来， 。由于微生态学理论和技 术 的 飞 速l f发 展 ， 人 们 逐 步 认 识 到 植 物 叶 围 ( p h y l l o s p h e r e ) 微生物的种群和互作关系比人们预 料的要更为复杂而多样【3 】 。 2 0 世纪7 0 年代以来，已有一些零星的报道对健 康植物叶片上叶面真菌和内生真菌作了比较研究。 日 本 学 者 Os o n o实 验 室 对 山 茱 萸(S w i d a c o n t r o v e r s a )、偃伏株木 ( C o r n u s s t o l o n if e r a )和纯 齿山毛榉 ( F a g u s c r e 口 )等植物的叶面真菌和内 生真菌进行了分离和比较。研究结果表明，植物叶 面和 内部组织生长有明显不同的真菌群落，真菌的 定植和分布受生长季节和叶片生育期的影响1 4 。 在 咖啡 ( c o ffe a a r a b i c a )的健康叶片上 ，生长有丰富 的真菌群落， 内生真菌和叶片真菌的种群差异明显， 交叉分布的种类很少：同时还发现 ，内生真菌的物 种多样性比叶面真菌更为丰富；不 同取样地点的同 种植物的l - f 片中，真菌群落也有差异p J 。 相对于种 i 类丰富、生态类型复杂多样的植物， 这些研究结果 显然不足于概述植物叶围真菌的全貌 - 茶树 ( C a m e l l ia s i n e n s i s )是一种重要的经济树 种 ，有关茶树相关微生物的研究 已经积累了一些资 料。在茶园土壤微生物、茶树生长繁殖与微生物、 微生物与茶叶加工贮藏、微生物与茶树保护、微生 物与茶的综合利用等多方面都有相关的报道【8 】 。卢 东升等对茶树内生真菌的种类及分布以及对豫南茶 园树栖真菌、芽及叶栖真菌群落及种群演替。做了大 量调查 ，并对茶园微生物及其应用进行了很好的总 结 1 。 丽华等【 J 。 l 对茶树 种 、叶片生育期和茶叶 化学成份对内生真菌的影响做过报道。但是 ，同时 分离茶树叶面真菌与内生真 菌，比较、分析它们的 种群结构及其差异，还未见相关的报道。 本研究对 茶树叶面真菌与内生真菌进行分离和鉴定， 以期进 一 步了解其种群结构及微生态关系。 1 材料与方法 收稿日期：2 0 1 0 O 1 3 1 基金项 目：福建省自然科学基金重点项目资助 ( B 0 6 2 0 0 0 5 ) 作者简介：张宇玲 ( I 9 8 5 ) ，_史，安徽亳州人 坝 生，主要从事植物与微生物互作方面的_ T = 作。 通讯作者：杨民和，教授，E - ma i l ：mi n h e 2 1 4 O n u e d u c n 2 0 1 0 年第 1 期 江 西 植 保 1 9 1 1 样本罘集 从福建农林大学园艺学院实验茶园( 福州金山) 采集健康成熟的叶片，茶树品种为黄旦和铁观音， 在茶园这两品种相邻种植 。采用五点取样法 每品 种每点分别取健康成熟叶片1 o H，共5 0 片。成熟叶 片指得是当年生长季节发 出的，叶色嫩绿、角质化 不明显的展开叶片。样本编号后，装入无菌纸袋， 带回实验室后立即进行真菌的分离 ，或将植物样本 存放于4 冰箱中备用。 i1 2 叶面真菌 采用两种方法分离茶树叶面真菌。分离方法1 ， 叶片组织粘 附法L 3 1 ：将采集的同一品种的茶树叶片 充分混合 ，然后随机取2 0 片，用直径为0 5 c m的无菌 打孔器取叶片组织块 ，从每 一叶片随机取6 个组织 块，分别接入补加5 0 m g 链霉素的P D A 培养基中， 每直径为9 c rn l的培养皿中放入6 8 个组织块 ( 3 4 块 近轴面朝下)，置于2 8 恒温培养箱中培养1 h 后 ， 再在无菌条件下将叶片组织块移出培养皿。将移走 叶片组织块的培养皿放,X 2 8 C 恒温培养箱中培养。 待出现菌落时， 按菌落形态的不同，挑取少量菌丝 进行分离纯化。 分离方法2 ， 稀释平板法： 将采集来 的同一品种的茶树叶片混合，分别选取形状大小相 近的茶树n r 片l o h - ，置于盛有1 0 0 ml 无菌水的三角 瓶内， 强力，、反复振荡1 5 m i n 后，制得菌悬液，稀 释 1 0 、I o 0 、l O 0 O 倍3 个不同浓度 ，用无菌吸管吸取 O 2 ml 接种到P D A平板中， 每个浓度梯度设3 个重复， 涂抹均匀后置于2 8 C 恒温箱中培养：待菌落长出后 统计菌落数并挑取单菌落于P D A 平板上纯化培养， 用于菌类 的鉴定。 1 3 内生真菌分离 内生真菌 的分离参见谢丽华等l l u 】 的方法。待叶 片组织周围出现菌体时，进行分离纯化。 1 4 真菌形态鉴定 由于分离获得的部分真菌在常规培养条件下不 产生繁殖体 ，按其在P D A培养基上的生长情况和菌 落形态划分为不同的形态型 ( mo r p h o s p e c i e s )。诱 导产孢 的方法如下：分离纯化的真菌移接 U P DA培 养基或经高压灭菌 的茶叶上 ，在2 8 恒温 、黑暗条 件下培养。至菌丝长满培养皿后 ，将培养皿取出， 放置于室温下继续培养；或在无菌条件下用接种环 轻刮菌丝表面，诱导真菌产生孢子。培养期间注意 观察真菌生长特征，随时进行照相记录。对在人工 培养条件能产孢的真菌，参照魏景超和陆家云等的 相关专著，进行真菌属 的初步鉴定 ：选择优势种真 菌 ( 分离率三 3 0 )采用I T S 序列分析鉴定 。 1 5 优势真菌I T S 序列分析 1 5 1 基因组DN A的提取参照武汉琴等 ( 2 0 0 9 ) 的方法进行。 1 5 2 r D N A I T S 的扩增与序 列测定n r DN A I T S 区用引物I T S 4 ： 5 - T C C T C C G C T T AT T G AT AT G C 3 和I T S 5 ：5 - G GAA GT AA AAGT C G T AA C AAG G 3 ， 按程序： 9 5 预变性5 mi n ；接以9 5 3 0 s ， 5 6 3 0 S ， 7 2 3 0 s ，3 0 个 循环 ；最后7 2 保温7 mi n 进行P C R 扩增。引物 由上海生 生物1 l f _I 程有限公 司合成。扩 增 的 反 应 体 系(2 5 g 1 ) ： 超 纯 水 1 6 7 5 g l ， 1 0 x Bu f f e r 2 5 g l ， 2 mmo l L d NT P 2 5 g l ， 1 0 g mo l L I TS 4 l p , l ，1 0 1 t mo l L I T S 5 1 g t ，T a q 酶0 2 5 g l ，模板1 l 。 P C R 产物经凝胶回收、纯化后送上海生工生物工程 有限公司测序 。 1 5 3 系统发育树的构建 以每个菌株的I T S 和 5 8 S 序列作为靶序列 ，在Ge n B a n k 中用B L AS T 程序 搜索同源序列，挑选与菌株序列相近的参考序列用 于系统发育分析 。利用B i o e d i t 软件 编辑，C l u s t a l x 软件将序列匹配排列，p h y l i p 3 6 7 构建I T S 系统树 ， 选用邻接法 ( Ne i b o r j o i n i n g )分析，每次搜索进 行随机1 0 0 0 次重复 ，获得的 自展检验 ( b o o t s t r a p ) 数值标记在分支上。 1 6 数据统计分析 叶面真菌和内生真菌的分离率按以下公式进行： 分 。 相对分离率( ) 某真菌 的菌落数 稀释平板上真菌菌落总 数 数据的显著性分析采用t 检验 ： 假设。 x 1 0 0 双样本等方差 2 结果与分析 2 1 茶树叶面真菌与 内生真菌多样性 采用常规叶部真菌分离方法 ，依据P D A培养基 上菌落形态的差异 ，从茶树 品种黄旦叶片上分离得 到叶面真菌共2 6 种形态型，其中1 5 种在P D A培养基 上能产生或诱导产生繁殖体 ； 内生真菌1 8 种形态型 ， 2 O 江 西 植 保 2 0 1 0年第 1 期 其 中6 种在P D A培养基上能产生或诱导产生繁殖 体，叶面真菌与内生真菌检 出率分别为1 0 0 和 8 7 5 2 ， 其中分离率大于3 的共1 8 种形态型。 从茶 树品种铁观音叶片分离到叶面真菌1 6 种形态型，其 中1 0 种在P D A培养基上 能产生或诱导产生繁殖体： 内生真菌1 5 种形态型 ，其 中7 种在P D A培养基上能 产生或诱导产生繁殖体 ，叶面真菌与内生真菌检 出 率分别为1 0 0 H 9 4 2 7 ，其中分离率大于3 的共 l 2 种形态型。人工培养条件下能产生繁殖体的真菌 包括拟盘多毛孢属 ( P e s t a l o t i o p s i s s p p )、芽枝霉属 ( C l a d o s p o r i u m s p )、短梗霉属 ( A u r e o b a s i d i u m s p , ) 、 青霉属 ( P e n i c i l l i u m s p p ) 、 曲霉属 ( A s p e r g i l l u s s p )、镰 刀菌属 ( F u s a r i u m s p )、球座 菌属 ( Gu i g n a r d i a s p )、刺盘孢属 ( C o l l e t o t r i c h u m s p p ) 的真菌。本研究中，同时分离获得一些人工培养条 件下不产孢或难于产孢的、未鉴定的真菌。 2 2 优势真菌鉴定 对分离率大于3 0 的6 种茶树叶围真菌，在形 态学观察的基础上 ， 进一步分析其I T S 序列， 采用邻 接法 ( N e i b o r j o i n i n g ) 构建N J 树， 进行初步的鉴 定。结果表明：菌株B l 为P e s t a l o t i o p s is t h e a e ，菌株 B 2 为C l a d o s p o H u m c l a d o s p o r i o i d e s( Ge n 3 a n k 序 列 号：F J 2 1 6 4 5 3 ) ，菌株B 4 为B o t r y o s p h a e r i a r h o d i n a (Ge n Ba n k序 列 号 ： F J 2 1 6 4 5 4)， 菌 株 B 8为 A u mo b a s i d i u m p u l l u l a n s (G e n B a n k序 列 号 ： F J 2 1 6 4 5 5) ，菌株 n s y 一 1 2为Gu i g n a r d i a ma n g l e r a e ( Ge n B a n k 序列号 ：E U 6 7 1 0 7 7 ) ，菌株N1 3 确定为 Co l l e t o t r i c h u m s p 。 2 3 两种方法分离叶面真菌比较 采用两种分离方法均分离到4 种相同的优势种 叶面真菌。但从分离所得的真菌总数上，稀释平板 法所得叶面真菌种类 ( 形态型)少于叶片组织黏附 法所获得的真菌：在茶树品种黄旦上，采用稀释平 板法分离到叶面真菌1 5 种形态型，而采用叶片组织 黏附法获得2 6 种形态型；在铁观音上，采用稀释平 板法分离到叶面真菌l 2 种形态型，而采用叶片组织 黏附法获得 l 6 种形态型。采用叶片黏附法获得的4 种优势真菌在茶树品种黄旦、铁观音中的分离率无 显著差异 ( p O O 1 )，但采用稀释平板法分离获得 的P e s t a l o t i o p s i s t h e a e 、 C l a d o s p o r i u m c l a d o s p o r i o i d e s 、 Au r e o b a s i d i u m p u l l u l a n s 在黄旦利铁 观音 中的相对 分离率存在显著 差异 ( p 0 O 1 )， B o t r y o s p h a e r i a r h o d i n a 无显著差异 ( p = O 3 3 ) ( 表1 ) 。 同时，采用不同分离方法，真菌数量也大不相同， 如采用叶片黏附法，P e s t a l o t i o p s i s t h e a e 在黄 旦和铁 观音中的分离率分别为9 0 5 7 和9 6 7 4 ： 而采用稀 释平板法，相对分离率分别只有7 4 7 和3 1 1 1 ； 其它3 种真菌的数量也存在明显的差异 ( 表1 )。因 此，采用不同的叶片表面真菌分离方法 ，检 出真菌 的种类和数量，均表现出明显的筹异。 表1 叶面真菌两种不同分离方法结果比较 Ta b l e 1 Co mp a r i s o n o f f u n g a l e p i p h y t e s wi t h t wo i s o l a t i o n m e t h o d s p 0 0 1 ：” P 6 4 1 0 )；内生真 菌中，G u i g n a r d ia m a n g if e r a e和 C o l l e t o t r i c h u m s p 可以部分重叠，有2 2 3 3 3 5 6 7 的C o l l e w m h u m 和G u ig n a r d ia 噼 从同一组织块中同时长 出。而P e s t a l o t i o p s i s t h e a e则一般单独长 出 ( 表2 )。 表2 茶叶叶面真菌与内生真菌优势种比较 T a b l e 2 E p i p h y t e s v s e n d o p h y t e s i n t h e s i x ma j o r f u n g a l s p e c i e s i s o l a t e d f r o m t e a l e a v e s 3 讨 论 结果显示，采用不同的分离方法用于分析真菌 的种群数量和结构，能显著地改变分离结果。叶片 洗涤后稀释平板分离法对那些以孢子粘附在叶面上 的真菌计数较为准确 ，但 以菌丝粘 附的真菌则难以 洗下 。而在培养基上黏附一定时间后移走叶片组织 块 ，却能分离到更多种类的叶面真菌。从叶片组织 黏附法的分离结果看，移去茶叶组织块 ，培养2 d 后 即可见 茶拟盘多毛孢 的菌丝 大量生长 。因此 ，在 P D A培养基上，茶拟盘多毛孢具有更强的生长能 力。对照于稀释平板法的结果 ( 表 1 )，可见茶拟盘 多毛孢在茶叶表面的数量并不比芽枝状枝孢霉和出 芽短梗霉更多，但因生长能力强 ，加上组织黏附法 对叶面的真菌没有稀释作用，因而生长迅速的真菌 易造成对生长慢的真菌的抑制作用。除少数情况外 【 J ，大多数研究者采用稀释平板法分离叶面真菌。 本研究的结果表明，采用两种方法分离、分析植物 叶面真菌，各有优点。但由于这些方法均依赖于培 养基的筛选作用， 因而也存在明显的缺陷。 采用P C R 扩增和变性梯度胶电泳技术 ( D G G E ) ， Y a n g等I ll2 J 在植物叶片表面洗涤液中检测到丰富的微生物群 落 ， 其中许多种类在人工培养基上难于分离。因此， 结合应用人工分离和分子生物学技术，能更为全面 地反映自然条件下茶树叶围真菌群落结构的真实情 况 。 研究结果表明，茶树叶围维持有丰富的真菌物 种多样性：茶叶表面和内部组织中，生长有完全不 同的真菌群落。黄旦叶面真菌与内生真菌的种类 ( p 0 0 1 )与数量 ( p 0 0 5 )均存在显著不同，在 黄旦f t r 片中叶面真菌的物种多样性 ( 2 6 种形态型) 远大于内生真菌物种多样性 ( 1 8 种形态型)；而在 铁观音中，叶面真菌的物种多样性 ( 1 6 种)与内生 真菌物种多样性 ( 1 5 种 )差异不大 ( p = O 5 5 )，但 各种真菌的数量存在显著差异 ( p 0 0 1 ) ( 表 1 ，表 2 )。在茶树叶围占优势的6 种真菌中，芽枝状枝孢 霉、出芽短梗霉和柑桔葡萄座腔菌只存在于茶叶的 表面 ；而芒果球座菌和刺盘孢菌只生活与茶叶组织 内。茶拟盘多毛孢既可生活于茶叶组织 内，也可生 活于茶叶表面 ( 表2 )：但茶拟盘多毛孢在茶叶表面 占据优势， 在茶叶内部组织中则分布很少 ( 3 ) 。 S a n t a ma r i a B a y ma n L 3 J 对咖M n -I 。 面真菌与 内生真 菌进行了研究，共分离得到内生真菌6 6 种 ，叶面真 菌6 3 种，其中仅4 种为叶面真菌与内生真菌所共有 ； 在叶面真菌中，B o t r y o s p h a e r i a s p S H P e s t a l o t i a s p 是 优势种真菌 ；而在 内生真菌 中，X y l a r ia s p 、 C o l l e r o t r i e h u m s p 和G u i g n a r d i a s p 是优势 种真 菌。在 山茱萸 ( S w i d a c o n o v e r s a )、纯齿山毛榉 ( F a g u s c r e n a t a )和偃伏株术 ( C o mu s s t o l o n if e r a ) 的叶部真菌研究中， 也得 出相似的结果【4 7 1 。 Os o n o i i 2 2 江 西 植 保 _ r 2 0 1：0 年 第 1 期 从山茶 ( C a m e l l ia j a p o n i c a ) 叶片中分离得到真菌共 7 9 种，其中叶面真菌5 2 种，内生真菌4 4 种，1 7 种为 叶面真菌与 内生真菌所共有 ：P e s t a l o t i o p s i s s p 、 C l a d o s p o r i u m c l a d o s p o r i o i d e s ， C o l l e t o t r i c h u m g l o e o s p o r i o i d e s 、 A u r e o b a s i d i u m p u l l u l a n s 等真菌作为 优 势种叶面真菌存在 ，而G e n i c u l o s p r i u m s p ， C o l l e t o t r i c h u m g l o e o s p o r i o i d e s和 C a c u t a t u m 则是 内生 真 菌 中的 优 势种 ：在 优 势 种 中 ，只 有 c o l i e to t r ic h u m g l o e o s p o r i o id e s为叶面真菌和内生 真菌种群所共有。和本研究的结果相比较，虽然同 为山茶属植物 ，茶树和山茶叶面真菌的种群组成较 为相似，但内生真菌的种群组成则很不同。以上分 析表明，在植物叶围，不同物种之间优势种叶面真 菌和 内生真菌的种类可能有不同：但在同一物种叶 片上，叶面真菌与内生真菌种群的组成均存在显著 的差异 。前人研究还显示，虽然植物叶围真菌的物 种多样性非常丰富， 但优势种真菌只是少数几种【 1 1 。本研究的结果支持这一结论。 研究结果还显示，在茶树叶嗣的优势真菌中， 除茶拟盘多毛孢可 以明确为茶树叶部的病原菌，在 一 定条件下可导致茶树轮斑病外 ，本研究分离获得 的其它叶围真菌，特别是优势种真菌，在茶树中均 未有作为病原菌的记录【 l 引 。这些真菌可能在维持茶 树叶围微生态平衡和病虫害控制等方面发挥重要的 作用 。当然 ，有 些真 菌也可 能 是茶树 的非 寄主 ( n o n h o s t ) 寄生物 ， 在一定条件下能导致其它植物 的病害。如芒果球座菌，是热带和亚热带植物叶部 的常见 内生真菌 ，寄主范围非常广泛，但偶尔也能 导致植物 的病 】 。像人体和动物肠道微生态系一 样 ，植物叶围微生态系中微生物的种群结构和数量 平衡 ，可能也会对植物健康产生深远的影响。 参考文献： 1 】施雯，张汉波叶面微环境和微生物群落微生物学通 报， 2 0 0 7 ， 3 4 ( 4 ) ： 7 6 1 7 6 4 【 2 】P e t r i n i O F u n g a l e n d o p h y t e s o f t r e e l e a v e s I n ： A n d r e ws j H，Hi r a n o S S e d s M i c r o b i a l E c o l o g y o f Le a v e s Ne w Yo r k ： S p r i n g e r Ve r l a g ， 1 9 91 ，1 7 9 - 1 9 7 【 3 】 S a n t a ma n a J ， B a y ma n P F u n g a l e p i p h y t e s a n d e r i d o p h y t e s o f c o f f e e l e a v e s ( C o ffe a a r a b i c a ) Mi c r o b i a l E c o I b g y ， 2 0 0 5 5 d ： 1 8 【 4 】 O s o n o T ， Mo r i A C o l o n i z a t i o n o f J a p a n e s e b e e c h l e a v e s b y p h y l l o s p h e r e f u n g i My c o s c i e n c e ， 2 0 0 3 ， 4 4： 4 3 7 - 4 4 1 5 】 O s o n o T ， Mo r i A Di s t r i b u t i o n o f p h y l l o s p h e r e f u n g i w i t h i n t h e c a n o p y o f g i a n t d o g wo o d My c o s c i e n c e ，2 0 0 4 4 5 ： l 61 1 6 8 6 】 O s o n o T ， B h a tt a B K 。 T a k e d a H P h y l lo s p h e r e t h n g i o n l i v i n g a n d d e c o mp o s i n g l e a v e s o f g i a n t d o g wo o d 2 0 0 4 ， My c o s c i e n c e ， 4 5 ： 3 5 4 1 【 7 】Os o n o T E n d o p h y t i c a n d e p i p h y t i c p h y l l o s p h e r e f u n g i o f r e d - o s i e r d o g w o o d ( C o r n u s s t o l o n r o ) i n B r i t i s h ：Co l u mb i a My c o s c i e n c e ， 2 0 0 7 ， 4 8： 4 7 5 2 【 8 】赵芹 茶微生物研究现状茶I 1。 l ， 1 9 9 9 ， 2 5 ( 1 ) ： 1 8 - 1 9 9 】卢东升茶园微生物与茶园病害微生态控制北京：中 国农业 出版社 2 0 0 6 【 l 0 】谢丽华，徐焰平，王国红，等茶树品种、 n t 生育期和 茶叶化学成份对内生真菌的影n 向 菌物研究， 2 0 0 6 ， 4 ( 3 ) ： 3 5 , 4 1 【 l 1 】武汉琴，苏经迁，谢I1月英，等茶树内生术霉种的茶定 及其 在植物 体内 的定殖 菌 物学报 ，主 0 0 9 ，2 8 ( 3 ) ： 3 4 3 4 8 【 1 2 】 Ya n g C H ，C r o w i e y D E ， B o r n e m a n 【 J ， 口 ， Mi c r o b i a l p h y l l o a p h e r e p 6 p u l a t i o n a r e mo r e e o mp l X t h a n p r e v i o u s l y r e a l i z e d P r o c Na t l Ac a d S c i US A ； 2 0 0 1 ， 9 8 ( 7 ) ： 3 8 8 9 3 8 9 4 ， 【 1 3 】 Os o n o T E n d o p h y t i c a n d e p i p h y t i c p h y l l o s p h e r e f u n g i o f C a m e l l i a j a p o n i c a ：s e a s o a a l a n d l e a f a g e - d e p e n d e n t v a r i a t i o n s My c o l o g i a , 2 0 0 8 ， l o 0 ( 3 ) ： 3 8 7 - 3 9 1 【 1 4 】陈雪芬中国常见茶树病害见：中国农业百科伞书编 辑部编著中国农业百科全书 茶业卷北京： 农业 出 版社， 1 9 8 8 3 3 4 【 1 5 】B a a y a n R P ，B o n a n t s P J M，Ve r k l e y G l e ，a 1 No n p a t h o g e n i c i s o l a t e s o f t h e c i t r u s b l a c k p O t f u n g u s ， Gu i g n a r d i a c i t r i c a r p a ， i d e n t i fi e d a s a c o s mo p o l i t a n e n d o p h y t e o f w o o d y p l a n t s ， G ma n g l a e【 P h y l l o s t i c t a c a p i t a l e n s i s ) P h y t o p a t h o l o g y ， 2 0 0 2 ， 9 2 ( 5 ) ： 4 6 4 4 7 7 ( 下接第 2 4页 ) 2 0 1 0年第 1 期 江 西 植 保 2 4 2 结果与分析 2 1 安全性 试验过程中， 各处理对水蕹菜未产生药害症状， 安全性较好。 2 2 防治效果 试验结果表明：苜核 苏云菌 S C对水蕹菜鳞翅 日害虫具有显著的防治效果。药后 7 d ，苜核 苏云 菌 S C 5 0 0 倍液、7 5 0倍液，4 0 辛硫磷 E C 7 5 0倍 液 3个处理的叶片被害率分别为 2 3 3 、3 0 0 、 3 6 7 ， 防治效果均在 8 0 以上， 极显著高 于苜核 苏 云菌 S C l 5 0 0处理的防效。约后 1 5 d ，苜核 苏云菌 S C 5 0 0倍液、7 5 0倍液 2个处理的丌 1 片被害率为 4 6 7 、5 3 3 ，防治效果为 9 4 0 4 、9 3 1 9 ，极 显著高于苜核 苏云菌 S C 1 5 0 0 处理的防效利对照药 剂 4 0 辛硫磷 E C 7 5 0倍液处理的防效。详见表 1 。 表 1 苜核苏云菌 S C防治水蕹菜鳞翅 目 害虫田问药效试验结果 差异显著性测定采用“ DMR T 法。同列中凡相同字母者表示在同一水平上差异不显著 3 小结与讨论 苜核 苏云菌 S C 是一种新型杀虫剂，其速杀性 好 、持效期长、杀虫谱广，在生产中具有广泛的推 广应用前景 。推荐使用剂量为 5 0 0 7 5 0倍液 ，用药 时间掌握在鳞翅 目害虫低龄幼虫盛发期。 往使J j 时， 按每壶水 1 5 k g 加入苜核 苏云菌 S C制剂 2 0 3 O ral ( 即配制成 5 0 0 7 5 0倍液 ) ，稀释 时先刚 1 左 的水稀释成母液后，再稀释搅拌均匀后喷雾。施药 宜在阴天全天或晴天下午 4时后进行， 以提高防效。 ( 上接第 2 2页) Co mp a r a t i v e An a l y s i s o f Ep i p h y t i c a n d En d o p h y t i e Ph y l l o s p h e r e Fu n g i o f Ca me ra s i n e n s i s ZHANG Yu Li n g ， LI Xi a o Ro ng ， YANG M i n He ( C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e s ， F u j i a n N o r ma l Un i v e r s i t y ， F u z h o u 3 5 0 1 0 8 ， C h i n a ) Ab s t r a c t ：I n t h e p r e s e n t s t u d y ，f u n g a l e p i p h y t e s a n d e n d o p h y t e s we r e i s o l a t e d f r o m h e a l t h y l e a v e s o f Ca me l l i a s i n
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网址: 茶树叶面真菌与内生真菌群落结构的比较 https://m.trfsz.com/newsview852589.html
