第一章血液样本采集和血涂片制备
第一章血液样本采集和血涂片制备
1.血液的组成。血液由血细胞和血浆组成，血清和血浆相比，血清缺少某些凝血因子。
2.血液标本采集。世界卫生组织（WHO）推荐成人血常规检查应采集左手无名指指端内侧血液，婴幼儿可采集大拇趾或足跟内外侧缘血液。血液标本采集应该严格无菌操作，针刺深度为2～3mm，应弃去第一滴血，切勿挤压。成人静脉采血部位为肘部静脉。
3.抗凝剂的应用。血细胞计数的抗凝剂为EDTA-K2。红细胞沉降率、出凝血实验，输血保养液的抗凝剂为枸橼酸钠，肝素是血气分析和红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂，但肝素可使白细胞聚集，并使血涂片在瑞氏染色时产生蓝色背景，不适合血液学一般检查。促凝剂适用于急诊生化检验。
4.合格的血涂片具备的特点。制片头体尾分明、细胞分布均匀、边缘整齐、两侧留空隙、厚薄适宜，血涂片血膜应占玻片长度的2/3左右。新载玻片常带有游离碱质，必须用约1mol/L HC1清洗后才能使用。
5.细胞染色。瑞氏染料由酸性染料伊红（E）、碱性染料亚甲蓝（M）及甲醇组成。染色原理：物理的吸附，化学的亲和作用。瑞氏染色最适pH为6.4～6.8。在偏酸性环境中（pH <pI）蛋白质带正电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏碱性环境中（pH>pI）蛋白质带负电荷增多，易与亚甲蓝结合，染色偏蓝。
6.方法评价。瑞氏染色法是最常用、最经典的细胞染色方法，尤其对细胞质成分、中性颗粒染色效果好，而姬姆萨染色法对细胞核和寄生虫的着色较好。
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