一种可与杀菌剂协同防治咖啡病害的生防菌及其应用
本发明属于微生物领域，具体涉及一种可与杀菌剂协同防治咖啡病害的生防菌及其应用。
背景技术：
1、咖啡属茜草科rubiaceae多年生常绿灌木或小乔木，是一类经济价值极高的热带经济作物和饮料作物，全球种植面积约为1100万hm2，其产量、消费量及产值居三大饮料作物之首，是发展中国家最具价值的贸易商品之一。2019年度全球咖啡收获面积1058.56万吨，咖啡豆产量为1001.62万吨，出口量为793.56万吨，进口量为771.76万吨，消费量为983.65万吨，农业总产值达300多亿美元；咖啡种植农户2500万户，为全球1.25亿人提供了就业机会，引用咖啡的人口达到15亿人，因此咖啡在世界热带农业经济、国际贸易以及人类生活中具有极其重要的地位和作用。近年来，由于咖啡产业发展迅速，已成为发展中国家最具价值的贸易商品之一。咖啡病虫害是制约世界咖啡产业健康发展的重要因子之一，轻则导致咖啡植株生长不良，重则导致咖啡植株死亡。
2、利用微生物来控制植物病害作为生物防治的重要组成部分已经被各国的研究者重视起来，新型生物制剂的研发能克服化学防治带来的种种问题，对可持续发展政策有着积极作用。芽孢杆菌能产生丰富的抗菌物质，这些物质在防治植物病害中起着重要作用，是新型农药研究的热点。化学防治具有高效、速效、使用方便、经济效益高等优点，但长期不当使用化学药剂不仅对植物产生药害，引起人畜中毒，杀伤有益微生物，还可导致病原物产生抗药性，同时农药的高残留还会对人类健康带来严重为害和对生态环境造成污染。生物防治中其生产原料来源广泛，对非靶标生物安全，毒副作用小，对环境兼容性好，对有害生物能够持续作用等优点，但单一的生物防治存在田间防效慢，防治效果不理想，易受环境影响的缺点。为了突破这些难题，将生物防治和化学防治有机结合起来，以达到优势互补，提高防治效果，降低化学药剂使用的目的。
3、目前还没有关于利用贝莱斯芽胞杆菌菌株及其代谢产物以及与杀菌剂协同防治咖啡病害的记载或报道。
技术实现思路
1、本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种可与杀菌剂协同防治咖啡病害的生防菌，对咖啡炭疽病菌、咖啡拟茎点霉叶斑病菌、咖啡褐斑病病菌等多种常见作物病原真菌有较强的抑菌作用。
2、本发明的第一个方面是提供一种生防菌，其命名为：贝莱斯芽胞杆菌(bacillusvelezensis)bs2c，于2022年7月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmcc no.25429。
3、本发明的第二个方面是提供如本发明第一个方面所述的生防菌的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物。
4、本发明的第三个方面是提供一种复配剂，其特征在于，含有杀菌剂，以及权利要求1所述的生防菌、或者权利要求2所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物。
5、其中，所述杀菌剂为咪鲜胺锰盐。
6、优选地，将所述杀菌剂配置成化学药剂，如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.01-5μg/ml，优选为0.01-0.5μg/ml，更优选为0.01-0.25μg/ml，更优选为0.01-0.1μg/ml。
7、优选地，将所述杀菌剂配置成化学药剂，如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.03-0.04μg/ml，优选为0.0369μg/ml。
8、优选地，将所述杀菌剂配置成化学药剂，如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.85-0.1μg/ml，优选为0.9140μg/ml。
9、优选地，将所述杀菌剂配置成化学药剂，如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.07-0.076μg/ml，优选为0.0736μg/ml。
10、优选地，将所述杀菌剂配置成化学药剂后，按照体积份数计，发酵液离心后的发酵液为0-10份(优选为0.1-10份，更优选为1-9份，更优选为5-7份)，所述化学药剂为0-10份(优选为0.1-10份，更优选为1-9份，更优选为3-5份)。
11、优选地，所述发酵液和化学药剂的体积比为1:9-9:1，优选为5:5-7:3，更优选为6:4。
12、本发明的第四个方面是提供如本发明第一个方面所述的生防菌，或者如本发明第二个方面所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者如本发明第三个方面所述的复配剂在拮抗咖啡炭疽病菌、和/或咖啡拟茎点霉叶斑病菌、和/或咖啡褐斑病病菌中的应用。
13、本发明第五个方面是提供如本发明第一个方面所述的生防菌，或者如本发明第二个方面所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者如本发明第三个方面所述的复配剂在制备防治咖啡炭疽病菌、和/或咖啡拟茎点霉叶斑病菌、和/或咖啡褐斑病病菌所致病害的生防制剂中的应用。
14、本发明的第六个方面是提供一种生防制剂，含有本发明第一个方面所述的生防菌，或者本发明第二个方面所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者本发明第三个方面所述的复配剂。
15、本发明的生防菌为芽胞杆菌属新种，该菌及其发酵液、发酵液离心后的上清液以及上清液的提取物等具有稳定拮抗活性，对咖啡炭疽病菌、咖啡拟茎点霉叶斑病菌、咖啡褐斑病病菌等咖啡致病菌有较强的抑菌作用，并与杀菌剂咪鲜胺锰盐相容性好，能够正常生长，而且可以协同作用，产生良好的增效。本发明增加了生防制剂有效成分安全来源，为咖啡病害的防治拓展新领域，具有良好的开发应用前景。
技术特征：
1.一种生防菌，其特征在于，其命名为：贝莱斯芽胞杆菌(bacillusvelezensis)bs2c，于2022年7月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏编号为cgmccno.25429。
2.如权利要求1所述的生防菌的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物。
3.一种复配剂，其特征在于，所述复配剂含有杀菌剂，以及权利要求1所述的生防菌、或者权利要求2所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物。
4.根据权利要求3所述的生防制剂，其特征在于，所述杀菌剂为咪鲜胺锰盐。
5.根据权利要求3或4所述的复配剂，其特征在于，将所述杀菌剂配置成化学药剂，所述化学药剂如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.01-5μg/ml，优选为0.01-0.5μg/ml，更优选为0.01-0.25μg/ml，更优选为0.01-0.1μg/ml。
6.根据权利要求3或4所述的复配剂，其特征在于，将所述杀菌剂配置成化学药剂，所述化学药剂中如果存在咪鲜胺锰盐，咪鲜胺锰盐的浓度为0.03-0.04μg/ml，优选为0.0369μg/ml；或者
7.根据权利要求5或6所述的复配剂，其特征在于，将所述杀菌剂配置成化学药剂后，按照体积份数计，发酵液为0-10份(优选为0.1-10份，更优选为1-9份，更优选为5-7份)，所述化学药剂为0-10份)优选为0.1-10份，更优选为1-9份，更优选为3-5份)；
8.如权利要求1所述的生防菌，或者如权利要求2所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者如权利要求3-7中任意一项所述的复配剂在拮抗咖啡炭疽病菌、和/或咖啡拟茎点霉叶斑病菌、和/或咖啡褐斑病病菌中的应用。
9.如权利要求1所述的生防菌，或者如权利要求2所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者如权利要求3-7中任意一项所述的复配剂在制备防治咖啡炭疽病菌、和/或咖啡拟茎点霉叶斑病菌、和/或咖啡褐斑病病菌所致病害的生防制剂中的应用。
10.一种生防制剂，其特征在于，含有权利要求1所述的生防菌，或者权利要求2所述的发酵液、或发酵液离心后的发酵上清液、或发酵上清液的环乙烷萃取物、或发酵上清液的石油醚萃取物、或发酵上清液的乙酸乙酯萃取物、或发酵上清液的正丁醇萃取物，或者权利要求3-7中任意一项所述的复配剂。
技术总结
本发明提供了一种生防菌，命名为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillusvelezensis)BS2C，于2022年7月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCCNo.25429。本发明的生防菌为芽胞杆菌属新种，该菌及其发酵液、发酵液离心后的上清液以及上清液的提取物等具有稳定拮抗活性，对咖啡炭疽病菌、咖啡拟茎点霉叶斑病菌、咖啡褐斑病病菌等咖啡致病菌有较强的抑菌作用，并与杀菌剂咪鲜胺锰盐相容性好，能正常生长，而且可以协同作用，产生良好的增效。本发明增加了生防制剂有效成分安全来源，为咖啡病害的防治拓展新领域，具有良好的开发应用前景。
技术研发人员：梁艳琼,吴伟怀,陆英,贺春萍,黄兴,谭施北,李锐,习金根,陈河龙
受保护的技术使用者：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/6/26
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