人瘦素(Human Leptin) ELISA检测试剂盒 Human Leptin ELISA Kit
瘦素是一种由脂肪细胞分泌产生的蛋白质类激素，它通过抑制饥饿来帮助调节能量平衡，被称为“饥饿激素”的胃饥饿素可拮抗瘦素发挥作用。瘦素分子量为16 kDa,是由146个氨基酸残基组成的非糖基化蛋白，人瘦素与小鼠和大鼠的同源性分别为87%和84%，且人瘦素在小鼠和大鼠中可发挥生物学活性。瘦素主要产生于白色脂肪组织的脂肪细胞，也由褐色脂肪组织、胎盘、卵巢、骨骼肌、胃、乳腺上皮细胞、骨髓、胃主细胞和P/D1细胞产生。瘦素的表达情况受体内激素、细胞因子及营养状态影响,如参与正能量平衡的胰岛素和糖皮质激素可促进瘦素表达，而参与负能量平衡的儿茶酚胺则抑制瘦素的表达。在肥胖人群中，瘦素的敏感性降低，导致在能量储备高的情况下无法察觉饱腹感。
翌圣Human Leptin ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆、细胞培养上清中的人瘦素(Human Leptin)。特异性抗人瘦素抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的人瘦素与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中人瘦素的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
货号
97036ES48 / 97036ES96
规格
48 T / 96 T
检测范围
15.63-1000 pg/mL
检测方法
双抗夹心法
检测物种
人
检测时长
5小时
灵敏度
0.586 pg/mL
稀释线性
81.9 - 96.1 %
回收率
73.9 - 106.9%
板内差
2.9%
板间差
3.6%
实验数据
标曲数据数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
人瘦素的最低检测限为0.586 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
精密度检测酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。
项目
板内精密度
板间精密度
样本
1
2
3
1
2
3
20
20
20
30
30
30
平均值
14.8
98.1
521.1
14.9
98.5
522.4
标准差
0.8
1.4
8.5
1.1
1.9
8.7
变异系数（%）
5.7
1.5
1.6
7.1
1.9
1.7
回收率检测通过不同水平的人瘦素添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
样本类型
平均回收率(%)
范围（%）
血清
91.7
77.5-106.9
血浆
89.0
75.8-105.3
细胞培养上清
87.9
73.9-101.5
稀释线性检测血清稀释比例
平均期望值(%)
范围（%）
1:02
91.1
89.6-92.3
1:04
86.9
85.6-88.6
1:08
86.9
85.8-88.1
1:16
91.7
90.7-93.7
血浆稀释比例
平均期望值(%)
范围（%）
1:02
91.2
90.6-92.1
1:04
86.2
82.7-88.2
1:08
84.3
82.2-85.5
1:16
91.7
90.7-93.4
细胞培养上清稀释比例
平均期望值(%)
范围（%）
1:02
89.2
86.8-93.8
1:04
85.4
83.1-88.5
1:08
86.7
81.9-92.3
1:16
94.6
93.2-96.1
样本应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
样本类型
样本数目
平均值（pg/mL）
样本值（pg/mL）
血清
10
7560.0
645.8-19580.0
肝素血浆
10
9461.5
21.9-20524.6
EDTA血浆
10
11340.4
4056.9-32826.0
枸橼酸钠血浆
10
5240.5
1325.3-15307.8
细胞培养上清
10
n.d.
n.d.
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内的15.63 pg/mL。
测定特异性本试剂盒识别天然和重组人瘦素。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
Recombinant human:
Recombinant mouse:
Recombinant rat:
IFN-γ
IL-17A
IFN-γ
IFN-γ
IL-1β
IL-18
IL-1β
IL-1β
IL-2
IL-21
IL-2
IL-4
IL-4
IL-22
IL-4
IL-6
IL-5
IL-23
IL-6
IL-10
IL-6
MCP-1
IL-10
TNF-α
IL-8
TGF-β1
IL-17A
IL-10
TNF-α
TNF-α
IL-12
VEGF
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