通过质谱法分析胰岛素和胰岛素类似物,Annals of Clinical Biochemistry: International Journal of Laboratory Medicine
我们饶有兴趣地阅读了 Dayaldasani 等人最近的研究，其中评估了三种胰岛素免疫测定对胰岛素类似物的交叉反应性。当然，这项研究是对文献的宝贵补充，对于目前使用所描述的检测方法的那些实验室来说，将是一个有用的参考。然而，毫无疑问，当使用免疫测定方法进行胰岛素分析时，结构修饰类似物的引入和广泛使用造成了重大的分析困境。在同一样品中可能存在内源性胰岛素和外源性胰岛素的情况下尤其如此。令人惊讶的是，在这项研究中没有提到使用基于质谱的检测方法来明确识别和同时分析胰岛素和胰岛素类似物的最新进展。在开发类似方法的其他人中，在我们的实验室中，我们发现质谱是一种强大的工具，它允许人们通过不同的质荷比 (m/z) 来区分胰岛素类似物。结合免疫亲和样品制备（质谱免疫分析，MSIA，Thermo Scientific）和同位素标记的胰岛素作为内标（Peptides International，路易斯维尔，肯塔基州），我们已经能够实现完全定量的胰岛素分析，具有非常低的限制检测（1mIU/L 胰岛素，500 mL 血清）并能够识别，即使在同一样品中，结构类似物（赖脯胰岛素、门冬胰岛素、甘精胰岛素、地特胰岛素、谷赖胰岛素、德谷胰岛素）和非人胰岛素（牛、猪）。同量异位素胰岛素和赖脯的色谱分离也已实现。我们最近使用高分辨率质谱法进行的研究允许对数据进行回顾性询问，这也表明有必要进行进一步的研究，不仅研究胰岛素类似物的交叉反应性，还研究其代谢物和/或降解产物的交叉反应性。将胰岛素类似物“掺入”到血清或血清池中的研究虽然本身很有用，但并没有解决这个问题。例如，在体内，先前已经报道甘精胰岛素被广泛代谢并作为两种代谢物或降解产物在尿液中排泄。接受甘精液处方的患者样本中甘精液代谢物的交叉反应性数据可能比甘精液本身的交叉反应性更有用。除了甘精胰岛素，并且更广泛地将这一原理应用于其他胰岛素之外，尚无研究证明胰岛素代谢物和/或降解产物与市售免疫测定范围内的交叉反应性（或缺乏交叉反应性）。此外，在复杂情况下，例如单个样品中存在多种胰岛素/降解产物时，仅使用免疫测定方法来鉴定（更不用说定量）胰岛素种类几乎是不可能的任务。对于这种情况，必须考虑基于质谱的分析。胰岛素类似物及其各自的降解产物应被视为进一步开发基于质谱的胰岛素分析方法的目标。因此，对于参考材料的供应商来说，将胰岛素类似物的生产及其降解产物作为参考标准，以及理想情况下，将同位素标记版本的生产纳入定量工作流程（如 MSIA），将是有用的。
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