茶叶有效成分-分离制备技术 茶叶中多酚类物质的提取纯化(一) 一、茶叶多酚类物质提取的影响因素1.原料粗细不同在相同提取条件下,磨碎茶样提取率高于未磨碎茶样。如用10%乙醇-水(V/V)在95°C热提45min,磨碎茶样提取液茶多酚含量为19.15%,未磨碎茶样仅为16.89%。2.不同的提取溶剂H.Horita报道,无水的有机溶剂乙醍、乙酸乙酯和丙酮提取24h,儿茶素得率仅4%?5%。而用含水溶剂(如丙酮、低级醇)提取1?4h,提取率可达100%。用90°C热水浸提lh,提取率仅为58%。提取能力依次为含水低级醇或丙酮>热水>无水有机溶剂(乙醒、丙酮、乙酸乙酯)。如表3-2。 一、茶叶多酚类物质提取的影响因素溶剂提取溶剂得率/%溶剂提取溶剂得率/%溶剂/%*时间/h儿茶素咖啡碱溶剂/%时间/h儿茶素咖啡碱乙酸乙酯,*100840—乙繼*100244一1-丙酮**100244—_2-丙酮501100791-丁醇801100100热水(90°C)—158100表3?2不同溶剂及浓度对茶中儿茶素的提取效果(陈宗道等,1999)*溶剂体积/水体积百分比广采用Soxhlet提取设备提取。 一、茶叶多酚类物质提取的影响因素茶多酚提取得率还与溶剂浓度有关,随溶液中乙醇浓度提高,提取率增加,50%乙醇-水(V/V)提取效率最高,但溶剂浓度对产品儿茶素的含量无明显影响。3.固液比在茶汁提取中,既要考虑作为提取溶剂的一定用水量以保证较高的提取率,又要考虑到后续纯化分离工序的浓缩或干燥效率等。一般认为使茶提取物含量在5%左右为宜,固液比为1:10~15,压滤后的滤渣可以1:5固液比再次浸提。 一、茶叶多酚类物质提取的影响因素4.提取时间延长提取时间,可提高提取率。沸水提取时间一般为45?90min。5.提取温度热提取液茶多酚含量高于冷提取液。95℃45min,提取液茶多酚为15.06%,但同样条件下40 ℃ ,提取液茶多酚仅为11.48%。此外,热提可使产率提高,但杂质含量亦会增加。从经济节能考虑,以低温(50°C)、适当延长提取时间为宜。 一、茶叶多酚类物质提取的影响因素6.加酶处理在茶汁提取时添加酶,如a-淀粉酶、糖化酶及果胶酶,均可使茶汤浸出物增加1.7%?16.2%,但对茶多酚溶出无明显影响。 茶叶有效成分-分离制备技术 茶叶中多酚类物质的提取纯化(三) 三、多酚类物质的纯化多酚类的主要成分是黄烷醇类,而黄烷醇类中70%左右是儿茶素类。儿茶素类结构中B环上羟基在提取时,由于反复受较高温度及接触空气中氧等影响极易氧化成酿型结构。据Ekana-YakeA.报道,这些醍型物质在非酶活性的条件下也能形成茶黄素和茶红素,所以多酚类的粗制品常常呈粉红色或浅褐色。尽管多酚类粗制品中茶黄素和茶红素对多酚类的生物活性影响不大,但由于它们的颜色常常限制了多酚类应用范围,有时生产上常常需要高纯度的多酚类,甚至仅需要其中的儿茶素类。因此,在某些情况下要对多酚类粗制品进行纯化,或者直接提取其中的儿茶素。 三、多酚类物质的纯化 先将多酚类粗制品溶于水,用乙醍萃取,乙醍层减压回收,真空干燥或冷冻干燥即得较纯的多酚类。水层用乙酸乙酯反复萃取,除去水层,收集乙酸乙酯层;将乙酸乙酯溶液层进行减压低温浓缩,最后在真空干燥箱中干燥,此时可得到多酚类初级氧化聚合物。1.多酚类粗制品的纯化 由于儿茶素由多种单体组成,而各种单体性质相差不大,因而分离较困难。儿茶素生产中目前较多使用两种方法,一为吸附型树脂及亲脂性凝胶层析法,另一为逆流色谱法。2.儿茶素的制备 三、多酚类物质的纯化(1)吸附型树脂及亲脂性凝胶层析法从粗多酚中制备儿茶素,目前主要用吸附型树脂及亲脂性凝胶过滤材料。HoritaH.等人用80%的乙醇从绿茶中抽提粗多酚,取25g该粗多酚,分别与不同的吸附剂(200mL)搅拌lh,然后用去离子水去杂后,再用80%乙醇从中萃取,比较了各种吸附剂对儿茶素的吸附及纯化情况。用ToyopearlHW-40或SephadexLH-20作为儿茶素的吸附剂最好,儿茶素在被吸附物中的含量分别是94.8%和90.8%,而咖啡碱含量又最低,分别是2.2%和5.2%°对于被ToyopearlHW-40或SephadexLH-20所吸附的杂质和少量的咖啡碱可用体积分数15%的乙醇洗脱。 三、多酚类物质的纯化经15%乙醇洗脱后,再用80%乙醇萃取,此时乙醇萃取液中儿茶素含量可达98.8%,而咖啡碱含量仅有0.01%。根据YayabeF.等介绍,对于粗多酚用SephadexLH-20吸附后,用30%和60%的丙酮逐步洗脱可进一步分离出简单儿茶素(非酯型儿茶素)和复杂儿茶素(酯型儿茶素)。 三、多酚类物质的纯化 (2)
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